页数:17页文件大小:113.5 KB来源: FoodChemistryandAnalysisppt课件
本课件讲授维生素的测定:先说明维生素 A 与 β-胡萝卜素在 440 nm 与 620 nm 双波长下的吸光度校正与定量,随后给出硫胺素硫色素荧光法、核黄素荧光法、烟酸溴化氰开环比色法,以及还原型维生素 C 的 2,6-二氯靛酚滴定法。
本页为维生素章节开篇,标示本章进入维生素 A(Vitamin A)的结构与性质。
本页主题为 β-胡萝卜素(β-Carotene),源文件仅给出名称,其双键与紫罗兰酮环结构建议对照原课件图片补充。
本页主题为维生素 A 与 β-胡萝卜素的测定,源文件仅给出标题,测定流程建议对照原课件图片补充。
β-胡萝卜素标准品的吸光度分别在 440 nm 与 620 nm 两个波长下测定,据此建立两条标准曲线用于分别定量胡萝卜素与维生素 A。
先利用 440 nm 处的吸光度,将其换算到 620 nm 处的贡献并从 620 nm 总吸光度中扣除,所得的差值即为维生素 A 在 620 nm 处的吸光度。
硫胺素(维生素 B₁)由嘧啶环与噻唑环构成;测定时将其氧化为硫色素(thiochrome),在 365 nm 激发、于 435 nm 测定荧光。
| 管号 | 样品/标准液 | NaCl | 氧化剂/碱 | 异丁醇 | 后处理 |
|---|---|---|---|---|---|
| 管 1(样品) | 5 ml 样品 | 2.5 g | 3 ml K₃FeCN₆ | 13 ml | 离心 |
| 管 2(样品空白) | 5 ml 样品 | 2.5 g | 3 ml NaOH | 13 ml | 离心 |
| 管 3(标准) | 5 ml 硫胺素标准液 | 2.5 g | 3 ml K₃FeCN₆ | 13 ml | 离心 |
| 管 4(标准空白) | 5 ml 硫胺素标准液 | 2.5 g | 3 ml NaOH | 13 ml | 离心 |
硫胺素标准溶液浓度 = 0.2 mg/ml。
计算:B₁(mg / 5 ml 测定样品)=(管 1 − 管 2)÷(管 3 − 管 4)。
核黄素(维生素 B₂):6,7-二甲基-9-D-1-核糖醇基异咯嗪(6,7 Dimethyl-9-D-1-Ribitylisoalloxazine)。
本页标示进入烟酸(Niacin)的测定内容。
烟酸与溴化氰(CNBr)加成后发生重排,吡啶环被打开并生成重排衍生物,该反应是烟酸比色测定的显色基础。
以 470 nm 处的吸光度为纵轴、烟酸微克数为横轴建立标准曲线,用于样品中烟酸的定量。
按上述参数代入即可计算样品中还原型维生素 C 的含量。
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