页数:34页文件大小:355.0 KB来源: FoodChemistryandAnalysisppt课件
本课件讲授色谱法基础:由分配系数与两相分配引出分离原理,依次展开液-固、液-液、离子交换与凝胶渗透四种液相色谱模式,介绍溶剂极性、模式选择、检测器类型,最后讲解保留时间、选择性、理论塔板高度与分离度及提高其分离度的措施。
色谱法:利用样品各组分在两相之间分配系数(平衡分布)的差异实现混合物分离的方法,其中一相为流动相,另一相为固定相。
组分对固定相的亲和力不同导致分离。分配系数(平衡分布) = 组分 A 在固定相中的浓度 ÷ 组分 A 在流动相中的浓度。
样品混合物通过填充固体颗粒(可涂渍或不涂渍另一液体)的色谱柱,在合适的溶剂与装柱条件下,部分组分在柱中迁移较慢,从而实现分离。
本页为简单液相柱色谱装置示意图,源文件仅给出「Diagram of Simple Liquid Column Chromatography」标题,柱体、溶剂与收集部分的标注建议对照原课件图片补充。
液-固色谱的分离机理基于混合物各组分对吸附剂(如硅胶 Silica Gel)活性位点的竞争吸附。
本页为液-固色谱示意图,源文件仅给出「LIQUID SOLID CHROMATOGRAPHY」标题,吸附与洗脱过程的图示建议对照原课件图片补充。
本页为水溶性维生素色谱图,源文件仅给出「WATER-SOLUBLE VITAMINS」标题,各维生素的峰位与分离条件建议对照原课件图片补充。
本页为水溶性维生素色谱图,源文件仅给出「WATER-SOLUBLE VITAMINS」标题,各维生素的峰位与分离条件建议对照原课件图片补充。
在固态载体表面涂渍第二种液体作为固定相,该液体与流动相溶剂互不相溶;样品在两相间的分配使部分组分被更多地延迟或保留,从而实现分离。
本页为色谱类型汇总图,源文件仅给出「Types of Chromatography」标题,各类型的分支与归类建议对照原课件图片补充。
离子交换色谱的分离基于样品中不同离子化合物对离子交换树脂(柱填料)活性位点的竞争。
本页为氨基酸离子交换色谱机理示意图,源文件仅给出「MECHANISM OF ION-EXCHANGE CHROMATOGRAPHY OF AMINO ACIDS」标题,交换过程建议对照原课件图片补充。
本页为氨基酸色谱图,源文件仅给出「Chromatography of Amino Acids」标题,洗脱顺序与峰形建议对照原课件图片补充。
凝胶渗透色谱是按溶液中分子尺寸进行的机械筛分:小分子能进入更多孔道,因而比大分子保留时间更长。
| 样品类型 | 液相色谱模式 |
|---|---|
| 位置异构体 | LSC 或 LLC |
| 中等极性分子 | LSC 或 LLC |
| 官能团相似的化合物 | LSC 或 LLC |
| 可电离物质 | 离子交换色谱 IEC |
| 溶解度差异大的化合物 | LLC |
| 分子大小不同的混合物 | 凝胶渗透色谱 GPC |
本页为液相色谱仪结构示意图,源文件仅给出「Schematic Diagram of Liquid Chromatography」标题,输液泵、进样器、色谱柱与检测器等部件标注建议对照原课件图片补充。
本页主题为高效液相色谱(High Performance Liquid Chromatography),源文件仅给出标题,仪器组成说明建议对照原课件图片补充。
本页主题为高效液相色谱(High Performance Liquid Chromatography),源文件仅给出标题,仪器组成说明建议对照原课件图片补充。
本页为发酵甘蓝(酸菜)中有机化合物的色谱图,源文件仅给出标题,各组分峰位与保留时间建议对照原课件图片补充。
本页为橙汁中化合物的色谱图,源文件仅给出标题,各组分峰位与保留时间建议对照原课件图片补充。
保留时间:样品从进样口出发,穿过色谱柱到达检测器所需的时间。
选择性(α):两个组分净保留时间之比,与平衡分配系数相关。
本页为选择性的图示,源文件仅给出「Selectivity」标题,两峰间距与保留时间的标注建议对照原课件图片补充。
本页为分离度(Resolution)方程式,源文件仅给出标题,公式各项符号建议对照原课件图片补充。
理论塔板高度:使化合物在柱中达到分配平衡所需要的柱长,用以衡量色谱柱的柱效。
本页为分离度图示,源文件仅给出「RESOLUTION」标题,两峰重叠程度的标注建议对照原课件图片补充。
| 组分 | 保留体积 V(分钟) | 峰宽 W(分钟) |
|---|---|---|
| V₀(死体积) | 1.02 | — |
| 组分 1 | 4.92 | 1.0 |
| 组分 2 | 6.59 | 1.0 |
| 组分 3 | 8.17 | 1.0 |
| 组分 4 | 9.14 | 1.0 |
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