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12 第12章 棒状杆菌属.pptx

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本课件围绕棒状杆菌属展开,系统讲解白喉棒状杆菌、涂片染色镜检与棒状杆菌属,依次梳理G+杆菌、抗毒素免疫、BAP中菌落等章节要点,并给出检验流程与结果判读提示,配合逐页图示帮助掌握本部分的检验思路与操作规范。

棒状杆菌属章节封面,标示本章主题与棒状杆菌属是一群革兰染色阳性杆菌、棒状杆菌属种类繁多等主要内容
棒状杆菌属是一群革兰染色阳性杆菌,菌体形态特征是在其一端或两端常呈棒状膨大
棒状杆菌属种类繁多,,主要有:白喉棒状杆菌(C.diphtheriae)假白喉棒状杆菌(
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第1页:棒状杆菌属

第12章棒状杆菌属

第2页:棒状杆菌属是一群革兰染色阳性杆菌

棒状杆菌属是一群革兰染色阳性杆菌,菌体形态特征是在其一端或两端常呈棒状膨大,故名,归属放线菌科。

第3页:棒状杆菌属种类繁多

,主要有:白喉棒状杆菌(C.diphtheriae)假白喉棒状杆菌(C.pseudodiphtheriticum)干燥棒状杆菌(C.xerosis)化脓棒状杆菌(C.pyogenes)溃疡棒状杆菌(C.ulcerans)假结核棒状杆菌(C.pseudotuberculosis)溶血棒状杆菌(C.haemolyticum)J-K群棒状杆菌(C.jeikeium-CDC group JK)

第4页:G+杆菌

G+杆菌

  • 染色不均匀,两端浓染或有异染颗粒
  • 无鞭毛、无芽胞
  • 排列不规则,呈栅栏状
  • 白喉棒状杆菌
    • 致病菌
  • 类白喉棒状杆菌
    • 条件致病菌

第5页:致病物质

致病物质

  • (一)白喉外毒素
  • 毒力强,130ng/kg可使人死亡
  • 抗原性强
  • 编码外毒素的tox基因
    • β-棒状杆菌噬菌体一、临床意义第一节白喉棒状杆菌C.diphtheriae

第6页:作用机制

作用机制

  • 作用特点:
  • 毒性作用大,1分子能杀一个细胞
  • 作用于多种细胞,心肌、神经细胞均有毒素受体
  • 肿瘤细胞对此毒素敏感

第7页:索状因子细菌表面的一种糖脂

索状因子细菌表面的一种糖脂

  • (二)索状因子细菌表面的一种糖脂,能破坏细胞的线粒体,影响细胞的呼吸与磷酸化
  • (三)K抗原--细胞壁外面的一种不耐热糖蛋白--抗吞噬--有利于细菌在黏膜表面的定植

第8页:G+杆菌所致疾病

G+杆菌所致疾病

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所致疾病:白喉--急性呼吸道传染病传染源:患者及带菌者传播途径:飞沫或污染临床表现细菌------上呼吸道黏膜,生长繁殖,产生毒素细菌与毒素共同作用引起局部炎症:炎性渗出,坏死,纤维蛋白→→假膜→→窒息毒素→→血液→→全身中毒症状外周N---N炎:膈肌麻痹---呼吸困难声带麻痹---声音嘶哑软颌麻痹---吞咽困难心肌---心肌炎

第9页:白喉假膜

白喉假膜

第10页:抗毒素免疫

抗毒素免疫

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抗毒素免疫感染后机体可获得牢固的免疫力机体还可通过其他方式获得免疫力:六月以下婴儿------母亲成人---------------隐性感染、人工主动免疫易感者:1~5岁儿童成人---也有可能免疫性:

第11页:抗毒素免疫微生物学检验

抗毒素免疫微生物学检验

  • 微生物学检验
  • 分离出白喉杆菌,并证明其毒力
  • 标本采集:分泌物双份血清如不能及时检验,标本浸于无菌生理盐水或15%甘油生理盐水保存

第12页:毒力试验患者或带菌者咽喉

、鼻咽拭子等直接涂片染色镜检(单染或G染色+异染颗粒染色)吕氏血清斜面35℃12~18h亚碲酸钾BAP、35℃24~48hBAP35℃16~18h涂片染色镜检(G染色和异染颗粒染色)观察菌落特点吕氏血清斜面生化反应涂片染色镜检白喉棒状杆菌的检验程序

第13页:直接涂片染色镜检--2~3张涂片→G染色

、异染颗粒染色镜检——G +细长微弯的杆菌一端或两端膨大呈棒状常排列呈V、L、X等文字形有异染颗粒——初报“直接涂片检出形似白喉杆菌”——早期诊断--用无菌棉拭子浸以动物血清,采集标本,37℃10h,涂片染色镜检——提高阳性率

第14页:白喉棒状杆菌异染颗粒1000×

白喉棒状杆菌异染颗粒1000×

第15页:分离培养

分离培养

  • 吕氏血清斜面:37℃、8~12h →→涂片染色镜检--检出率要比直接涂片高,有助于快速诊断

第16页:BAP中菌落

BAP中菌落

  • 菌落灰白色、光滑型、直径1~2mm、有狭窄β溶血环(轻型)
  • 多次传代后菌体变为球型

第17页:亚碲酸钾BAP

亚碲酸钾BAP

  • 黑色菌落
    • 鉴别依据
  • 不同菌型还原能力不同,呈现黑色或灰黑色菌落
  • 根据菌落特征及生化反应特点可将本菌分为:重型、中间型、轻型白喉棒状杆菌在亚碲酸钾BAP中菌落

第18页:液体培养基

液体培养基

•液体培养基:生长较好,但菌型不同其生长特点也不相同

第19页:BAP中菌落鉴定

BAP中菌落鉴定

  • 鉴定
  • 形态染色、菌落特点、生化反应
  • 糖发酵试验、尿素酶、硝酸盐还原
    • 鉴别棒状杆菌属不同的种白喉:葡萄糖(+)、麦芽糖(+)蔗糖(-)

第20页:毒力试验(鉴定致病菌株的重要依据)

毒力试验(鉴定致病菌株的重要依据)

  • 体外法:琼脂平板毒力试验(Elek平板毒力测定)SPA协同凝集试验对流电泳琼脂平板毒力试验-Elek平板对流免疫电泳

第21页:体内法

体内法

•体内法:用豚鼠作毒素-抗毒素中和试验

第22页:锡克试验(

锡克试验(

  • 调查人群在感染或预防接种后对白喉是否产生免疫力
  • 根据外毒素与抗毒素中和的原理,以少量白喉外毒素测定机体有无相应抗毒素
  • 缺点
    • 观察时间长、操作繁琐,不易进行广泛测试

第23页:《致敏红细胞凝集试验》

《致敏红细胞凝集试验》

  • 测定血清中抗毒素水平
  • 1ml血清,倍比稀释+外毒素致敏红细胞37℃、1h
  • 敏感度可达10-4单位,简便快速

第24页:结膜干燥棒状杆菌(C.xerosis)

结膜干燥棒状杆菌(C.xerosis)

  • (二)结膜干燥棒状杆菌(C. xerosis)
  • (三)化脓棒状杆菌(C. pyogenes)
  • (四)溃疡棒状杆菌(C. ulcerans)
  • (五)假结核棒状杆菌(C. pseudotuberculosis)
  • (六)溶血棒状杆菌(C. haemolyticum)
  • (七)杰克群棒状杆菌(C. jeikeium-CDC group JK)
  • (一)假白喉棒状杆菌(C. pseudodiphtheriticum)第二节类白喉棒状杆菌

第25页:共同特点

共同特点
--大多不产生外毒素--菌体较粗短,着色较均匀,很少有异染颗粒--大多寄生在人或动物的鼻腔、咽喉、外耳道、外阴、泌尿道和皮肤等处--条件致病菌,可引起心内膜炎、菌血症、肺炎、泌尿生殖道感染等--鉴别——生化反应
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