第1页：肠杆菌科
第8章肠杆菌科
第2页：肠杆菌科
肠杆菌科
- 是栖居在人和动物的肠道内的一大群形态、生物学性状相似的革兰阴性杆菌。
- 广泛分布在自然界中，包括植物、土壤、水以及人和动物的肠道中，多数是正常人肠道菌群的重要成员，在机体的其他部位相对较少。
第3页：肠杆菌科
肠杆菌科
- 包括致病性较强、能引起人类传染病的菌属：鼠疫耶尔森菌、伤寒沙门菌
- 引起人类腹泻和肠道感染的菌属（四个）
- 埃希菌属
- 志贺菌属
- 沙门菌属
- 耶尔森菌属
第4页：与医院感染有关的条件致病菌
与医院感染有关的条件致病菌
- 枸橼酸杆菌属
- 克雷伯菌属
- 肠杆菌属
- 泛菌属
- 沙雷菌属
- 变形杆菌属
- 普罗威登菌属
- 摩根菌属
第5页：正常菌群与条件致病菌
正常菌群与条件致病菌
- 有许多细菌既是肠道的正常菌群，也是条件致病菌。
- 在一定的条件下，能引起机会感染或二重感染。
- 1）机体抵抗力下降
- 2）寄居部位的改变
- 3）肠道菌群失调
- 约40种以上肠杆菌科菌种可以在临床标本中出现。
第6页：大肠埃希菌
大肠埃希菌
- 埃希菌属（Escherichia）包括5个种。
- 大肠埃希菌（E．coli）是最常见的临床分离菌，也是肠道中革兰阴性杆菌的主要成员，常引起各种肠内外的感染，是腹泻和泌尿道感染的主要病原菌，又分为正常（Normal）和不活泼（Inactive）2个亚种。
第7页：蟑螂埃希菌（E．blattae）不常见
蟑螂埃希菌（E．blattae）不常见
- 弗格森埃希菌（E．fergusonii）
- 赫尔曼埃希菌（E．hermannii）
- 伤口埃希菌（E. vulneris）。
- 本菌属细菌的DNA G＋C为48～52mol％。本节以大肠埃希菌为代表叙述。
第8页：临床意义
临床意义
- （一）致病因素1．侵袭力本菌的K抗原和菌毛与侵袭力有关。K抗原：能抗吞噬，并能够抵抗抗体和补体的作用。菌毛：能帮助细菌黏附于黏膜表面，使细菌在肠道内定殖，产生毒素而引起相应症状。有侵袭力的菌株能直接侵犯肠道黏膜上皮引起炎症。
第9页：内毒素大肠埃希菌的细胞壁有内毒素活性
2．内毒素大肠埃希菌的细胞壁有内毒素活性，其毒性部位在类脂A（lipidA），与所有革兰阴性杆菌产生的内毒素一样，具有相似的病理生理作用，如发热、休克、DIC等。
第10页：肠毒素不耐热肠毒素
3．肠毒素不耐热肠毒素（heatlabiletoxin，LT），加热65℃、30分钟即被破坏；耐热肠毒素（heatstabletoxin，ST）LT和ST均可使肠道细胞中cAMP的水平升高，引起肠液大量分泌而导致腹泻。
第11页：临床意义所致疾病
临床意义所致疾病
- 所致疾病
- 肠道外感染泌尿道感染（最常见）胆道感染、腹膜炎、肺炎菌血症、新生儿脑膜炎
- 肠道感染ETEC、EPEC、EIEC、EHEC、EAEC
第12页：引起肠道感染的大肠埃希菌的主要致病特征等
引起肠道感染的大肠埃希菌的主要致病特征危险因素发病年龄主要临床表现感染类型致病机制菌株海外旅行成人、儿童大量水样便，腹痛、恶心、脱水腹泻，旅行者腹泻LT和STETEC＜2岁婴儿、成人水样便、发热、呕吐、黏液便急性腹泻黏附因子EPEC海外旅行成人脓血便，便中含红、白细胞和黏液，发热、腹痛志贺样脓血便侵入结肠黏膜上皮EIEC未熟牛肉牛奶儿童、老人腹泻（无WBC），腹痛、血便、发热、HUS腹泻、出血性肠炎类志贺毒素EHEC所有年龄水泻、呕吐急、慢性腹泻未明EAEC
第13页：细菌特性
细菌特性
第14页：大肠埃希菌革兰染色形态特征
大肠埃希菌革兰染色形态特征
第15页：大肠埃希菌电镜图返回
大肠埃希菌电镜图返回
第16页：细菌特性培养特性
细菌特性培养特性
- 培养特性
- 兼性厌氧，营养要求不高
- 在普通营养琼脂上生长良好，形成较大的圆形、光滑、湿润、灰白色的菌落
第17页：大肠埃希菌菌落特征（血平板）培养特性
大肠埃希菌菌落特征（血平板）培养特性
第18页：大肠埃希菌菌落特征（
大肠埃希菌菌落特征（
大肠埃希菌菌落特征（MAC）返回在肠道选择培养基上可发酵乳糖，形成有色菌落。
第19页：细菌特性生化反应
细菌特性生化反应
- 生化反应
- 发酵多种糖产酸产气，
- 吲哚、甲基红、V-P、枸橼酸盐（IMVC）等4个试验的结果为＋＋――，
- 在克氏铁琼脂（KIA）上斜面和底层均产酸、产气，H2S阴性（AA＋―），
- 在动力、吲哚、脲酶（MIU）培养基上的反应结果为＋＋―，
第20页：大肠埃希菌抗原结构返回
大肠埃希菌抗原结构返回
第21页：O抗原是多糖磷脂复合物（LPS）
O抗原是多糖磷脂复合物（LPS）
- H抗原是不耐热的蛋白质，已知有56种，均为单相菌株。
- K抗原是多糖荚膜抗原，对热稳定，在K抗原存在时能阻止O凝集。已知有100种，不是每个菌株均有K抗原。
- 大肠埃希菌的血清型别按O：K：H的顺序，以数字表示，如O111：K58：H2、O157：H7等。
第22页：细菌特性检验程序
细菌特性检验程序
- （一）检验程序
- （二）标本采集
- （三）检验方法
- （四）耐药性
- （五）结果分析与报告三、微生物学检验
第23页：大肠埃希菌检验程序
大肠埃希菌检验程序
第24页：1）ETEC
1）ETEC
- 生化反应符合大肠埃希菌，属于一些特定的血清型别；
- 主要依赖ST和LT肠毒素的检测，常用生物学方法或细胞培养、免疫学和分子生物学方法。
第25页：2）EPEC
2）EPEC
- 用多价抗血清检测其O抗原。取5～10个乳糖阳性的大肠埃希菌菌落，进行特异性抗血清的凝集试验，3）EIEC：生化反应加血清分型加毒素测定，
- 本菌与志贺菌相似，多数EIEC为动力阴性，乳糖不发酵或迟缓发酵。
- 所有EIEC菌落均为赖氨酸脱羧酶阴性，无动力，其中最常见的血清型O152和O124为乳糖阴性，与志贺菌的抗血清有交叉反应，两菌属十分相似，
- 主要的鉴别试验：醋酸钠、葡萄糖铵利用试验和粘质酸盐产酸试验，大肠埃希菌三者均阳性，而志贺菌三者均阴性。
- 毒力测定（豚鼠眼结膜试验）：以被检菌液接种于豚鼠眼结膜囊内，产生典型的角膜结膜炎症状，并在角膜上皮细胞内出现大量细菌者，为毒力试验阳性。
第26页：4）EHEC
4）EHEC
- 可用山梨醇麦康凯琼脂（SMAC）直接筛选不发酵山梨醇的菌落（35～37℃培养24～48h后选无色菌落），经次代培养后可用胶乳凝集试验检测O157抗原。
第27页：O157
O157
O157:H7菌落特征（山梨醇麦康凯琼脂平板）返回
第28页：沙门菌属
沙门菌属
沙门菌属一、分类二、细菌特性三、临床意义四、微生物学检验
第29页：分类
分类
第30页：细菌特性
细菌特性
第31页：伤寒沙门菌革兰染色
伤寒沙门菌革兰染色
- （一）形态特征革兰阴性直杆菌，较细长，大小0.7～1.5μm×2.0～5.0μm，多具有周鞭毛，能运动，有时会出现无鞭毛的突变型。无芽孢，无荚膜。
第32页：伤寒沙门菌菌落特征（血平板）
伤寒沙门菌菌落特征（血平板）
- （二）培养特性兼性厌氧，最适生长温度35～37℃，最适生长pH为6.8～7.8。本菌属对营养的要求不高，在普通营养琼脂上生长的菌落为圆形、光滑、湿润、半透明、边缘整齐的菌落，有时可出现粗糙型的菌落。
第33页：伤寒沙门菌菌落特征（
MAC）在肠道选择性培养基上菌落小至中等，透明或半透明，乳糖不发酵，与志贺菌的菌落相似
第34页：伤寒沙门菌菌落特征（
伤寒沙门菌菌落特征（SS）有些能产生硫化氢的菌株，在SS琼脂上形成中心黑色的菌落。
第35页：伤寒沙门菌
伤寒沙门菌
- （三）生化反应乳糖阴性、在三糖铁琼脂中表现为产碱/产酸或产碱/产酸产气，H2S阳性、脲酶阴性
第36页：沙门菌IMViC试验（－＋－－）吲哚阴性
、动力阳性、VP阴性、枸橼酸盐阴性、鸟氨酸阳性。凡临床分离菌乳糖阳性、吲哚阳性或脲酶阳性者均不考虑为沙门菌。
第37页：细菌特性抗原结构
细菌特性抗原结构
- （四）抗原结构
- 主要有3种，即菌体（O）抗原、鞭毛（H）抗原及表面抗原（Vi抗原等）。
- O抗原为多糖－类脂－蛋白质复合物，具耐热性，能耐受100℃2.5h。O抗原共有58种，以阿拉伯数字顺序排列，现已排至第67，但其中有9种被删除，故数字是不连续的。每个沙门菌的血清型可含一种或数种O抗原。
第38页：凡含共同抗原成分的血清型归为一个群
凡含共同抗原成分的血清型归为一个群
- 其刺激机体产生的抗体以IgM为主，与相应的抗血清反应时呈颗粒状凝集。
第39页：细菌特性所致疾病
细菌特性所致疾病
- 所致疾病
- 伤寒和副伤寒
- 急性胃肠炎或食物中毒
- 菌血症（或败血症）
第40页：肠热症
肠热症
- 即指伤寒和副伤寒。最典型的是由伤寒沙门菌引起的伤寒，表现为发热、血培养或肥达反应阳性。
- 肠热症也可由其他沙门菌引起，常表现为轻度发热和腹泻。
第41页：伤寒的发病过程
伤寒的发病过程
- 细菌随污染的食品或水经口感染，穿过小肠上皮进入黏膜下组织。细菌在此被吞噬细胞吞噬，但吞噬后不被消灭反在吞噬细胞内繁殖，并随吞噬细胞经淋巴管到达淋巴结。
- 在淋巴结内大量繁殖后，经胸导管进入血流（第一次菌血症）。此时黏膜在临床上出现发热、不适等症状。
第42页：随后
随后
- 胆囊中的细菌随胆汁进入肠腔，可经粪便排出，肾脏中的细菌随尿排出体外。
第43页：本病潜伏期7～20天
本病潜伏期7～20天
- 携带者：伤寒沙门菌感染过后约3％患者可成为携带者，在粪便中可持续排菌长达1年或1年以上。
第44页：细菌特性检验程序
细菌特性检验程序
- （一）检验程序
- （二）标本采集
- （三）检验方法四、微生物学检验
第45页：沙门菌检验程序
沙门菌检验程序
第46页：细菌特性标本采集
细菌特性标本采集
- 标本采集
- 根据疾病的类型、病情和病程的不同分别采集不同的标本。
- 伤寒沙门菌分离培养原则上于发病第1周取血，第2、3周取粪便做培养的分离率高，第3周也可取尿液培养，全病程均可作骨髓培养。
- 血清学诊断应在病程的不同时期分别采集2～3份标本。
第47页：细菌特性鉴定
细菌特性鉴定
- 鉴定
- 挑选疑为沙门菌的可疑菌落（EMB上无色或不透明琥珀色；MAC上较小、无色透明；SS上不透明或透明、无色或中央为黑色的菌落；XLD上呈红色或中央为黑色的菌落）。将可疑菌落进一步鉴定到属和种（生化、血清学试验）。
第48页：沙门菌血清学鉴定
沙门菌血清学鉴定
第49页：
第50页：抗体检测（肥达反应）
抗体检测（肥达反应）
- 用已知伤寒、副伤寒沙门菌的O、H抗原，检测受检血清中有无相应的抗体的半定量凝集试验，称为肥达反应（Widaltest）。
- 与细菌分离培养同时进行或在前者失败的情况下，能辅助诊断伤寒、副伤寒A、B和C引起的肠热症。
第51页：330株沙门菌属对常用抗菌药物的耐药率等
330株沙门菌属对常用抗菌药物的耐药率耐药率(%)亚胺培南头孢哌酮/舒巴坦哌拉西林/他唑巴坦氨苄西林/舒巴坦头孢曲松环丙沙星左氧沙星头孢吡肟头孢呋辛头孢唑啉
第52页：志贺菌属
志贺菌属
志贺菌属一、分类二、细菌特性三、临床意义四、微生物学检验
第53页：分类志贺菌属
- 分类志贺菌属分为A、B、C、D4群
- A群为痢疾志贺菌（S.dysenteriae），B群为福氏志贺菌（S.flexneri），C群为鲍氏志贺菌（S.boydii），D群为宋内志贺菌（S.sonnei）。
第54页：细菌特性
细菌特性
第55页：志贺菌革兰染色
志贺菌革兰染色
- （一）形态结构革兰阴性杆菌，菌体短小，无芽孢，无荚膜，无鞭毛，有菌毛。
第56页：志贺菌菌落特征(MAC)
志贺菌菌落特征(MAC)
- （二）培养特性
- 兼性厌氧，最适生长温度为37℃，最适pH为7.2～7.4。
- 对营养的要求不高，能在普通培养基上生长。
- 在肠道鉴别培养基上形成乳糖不发酵、中等大小、无色半透明的菌落，宋内志贺菌常形成粗糙型菌落。
第57页：细菌特性抗原结构
细菌特性抗原结构
- （四）抗原结构
- 无H抗原，有O抗原，部分菌种有K抗原。
- O抗原是分类的依据，有群特异性和型特异性两种抗原，根据生化反应和O抗原的不同，将志贺菌属分为4个血清群（A、B、C、D）和40余个血清型。O抗原耐热，加热100℃、60min不被破坏。
- K抗原存在时能阻断O抗原与相应抗血清的凝集作用。加热100℃、60min可消除K抗原对O抗原的阻断作用。
第58页：细菌特性抵抗力
细菌特性抵抗力
- （六）抵抗力
- 本属细菌对理化因素的抵抗力较其他肠杆菌科细菌为低。
- 在1％石炭酸中15～30min和加热60℃10min即被杀死，对酸较敏感，在运送时须使用含有缓冲剂的培养基。
第59页：致病物质所致疾病
致病物质所致疾病
致病物质所致疾病三、临床意义
第60页：所致疾病志贺菌属引起细菌性痢疾
所致疾病志贺菌属引起细菌性痢疾
第61页：细菌特性检验程序
细菌特性检验程序
- （一）检验程序
- （二）标本采集
- （三）检验方法四、微生物学检验
第62页：志贺菌检验程序
志贺菌检验程序
第63页：细菌特性标本采集
细菌特性标本采集
- 标本采集
- 在抗生素使用前采集新鲜粪便中脓、血、黏液部分，床边接种或立即送检，不能及时接种者可用卡-布运送培养基送检，昏迷不能排便患者可用肛拭取样。
第64页：275株志贺菌属对常用抗菌药物的耐药率等
275株志贺菌属对常用抗菌药物的耐药率耐药率(%)亚胺培南头孢哌酮/舒巴坦哌拉西林/他唑巴坦氨苄西林/舒巴坦头孢曲松环丙沙星左氧沙星头孢吡肟头孢呋辛头孢唑啉
第65页：克雷伯菌属
克雷伯菌属
克雷伯菌属一、分类二、细菌特性三、临床意义四、微生物学检验
第66页：肺炎克雷伯菌（K.pneumoniae等
肺炎克雷伯菌（K.pneumoniae）产酸（催娩）克雷伯菌（K.axytoca）解鸟氨酸克雷伯菌（K.ornithinolytica）植生克雷伯菌（K.planticola）土生克雷伯菌（K.terrigena）肺炎克雷伯菌又可分为3个亚种：肺炎克雷伯菌肺炎亚种（subsp.pneumoniae）肺炎克雷伯菌臭鼻亚种（subsp.ozaenae）肺炎克雷伯菌鼻硬结亚种（subsp.rhinoscleromatis）一、分类
第67页：细菌特性
细菌特性
第68页：肺炎克雷伯菌革兰染色
肺炎克雷伯菌革兰染色
- （一）形态结构肺炎克雷伯菌为革兰阴性杆菌，无鞭毛，无芽孢
第69页：肺炎克雷伯菌荚膜染色患者标本直接涂片或等
肺炎克雷伯菌荚膜染色患者标本直接涂片或在营养丰富培养基上的培养物可见菌体外有明显的荚膜。
第70页：肺炎克雷伯菌的菌落特征（血琼脂平板）
肺炎克雷伯菌的菌落特征（血琼脂平板）
- （二）培养特性兼性厌氧，营养要求不高，在初次分离培养基可形成较大、凸起灰白色黏液型的菌落。菌落大而厚实、光亮，相邻菌落容易发生融合
第71页：肺炎克雷伯菌的菌落特征（
MAC）在MAC培养基上发酵乳糖产酸，形成较大的黏液型、红色的菌落，红色可扩散至菌落周围的培养基中。
第72页：肺炎克雷伯菌粘丝试验用接种针沾取时可挑等
肺炎克雷伯菌粘丝试验用接种针沾取时可挑等
- 肺炎克雷伯菌粘丝试验用接种针沾取时可挑出长丝状细丝。
第73页：克雷伯菌属的细菌多感染免疫力低下的人群
，是医院感染中最重要的条件致病菌。所致疾病：肺炎、脑膜炎、腹膜炎、泌尿系统感染、败血症三、临床意义
第74页：肺炎克雷伯菌是临床标本中常见的细菌
•肺炎克雷伯菌是临床标本中常见的细菌，可引起典型的原发性肺炎。该菌在正常人口咽部的带菌率为1%～6%，在住院患者中可高达20%，是酒精中毒者、糖尿病和慢性阻塞性肺部疾病患者并发肺部感染的潜在的危险因素。
第75页：肺炎克雷伯菌肺炎亚种还能引起各种肺外感染
肺炎克雷伯菌肺炎亚种还能引起各种肺外感染
- 近年在一些亚洲地区（特别是台湾和韩国）由肺炎克雷伯菌引起的肝脓肿等严重社区获得性侵袭性感染有上升的趋势。
第76页：细菌特性检验程序
细菌特性检验程序
- （一）检验程序
- （二）标本采集
- （三）检验方法
- （四）耐药性四、微生物学检验
第77页：肺炎克雷伯菌检验程序
肺炎克雷伯菌检验程序
第78页：细菌特性鉴定
细菌特性鉴定
- 鉴定
- 属的鉴定：动力阴性，鸟氨酸脱羧酶阴性（解鸟氨酸劳特菌阳性），克雷伯菌属与肠杆菌科中主要引发医院感染的其他条件致病菌鉴别见教材表8-17。
- 种的鉴定：肺炎克雷伯菌吲哚阴性，而产酸克雷伯菌吲哚阳性，本菌属各菌种之间的鉴别见表教材8-18。
第79页：克雷伯菌属与其他条件致病菌鉴别生化反应等
克雷伯菌属与其他条件致病菌鉴别生化反应等
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克雷伯菌属与其他条件致病菌鉴别生化反应克雷伯菌属肠杆菌属泛菌属哈夫尼菌属沙雷菌属肺炎克雷伯菌产酸克雷伯菌产气肠杆菌阴沟肠杆菌成团泛菌蜂房哈夫尼菌粘质沙雷菌液化沙雷菌吲哚－+－－（－）－－－动力－－++（+）（+）++赖氨酸+++－－+++精氨酸－－－+－－－－鸟氨酸－－++－+++Dnase（25℃）－－－－－－+（+）明胶酶（22℃）－－－－－－++乳糖++++d－－－蔗糖++++d－++山梨醇++++d－++侧金盏花醇+++（－）－－d－阿拉伯糖++++++－+
第80页：10533株肺炎克雷伯菌对常用抗菌药物等
10533株肺炎克雷伯菌对常用抗菌药物的耐药率耐药率(%)亚胺培南头孢哌酮/舒巴坦哌拉西林/他唑巴坦氨苄西林/舒巴坦头孢曲松环丙沙星左氧沙星头孢吡肟头孢呋辛头孢唑啉
第81页：肠杆菌属
肠杆菌属
肠杆菌属一、分类二、细菌特性三、临床意义四、微生物学检验
第82页：产气肠杆菌（E.aerogenes）阴等
产气肠杆菌（E.aerogenes）阴沟肠杆菌（E.cloacea）日勾维肠杆菌（E.gergoviae）阪崎肠杆菌（E.sakazakii）中间型肠杆菌（E.intermedium）泰洛肠杆菌（E.taylorac）河生肠杆菌（E.amnigenus）阿氏肠杆菌（E.asburiac）致癌肠杆菌（E.cancerogenus）溶解肠杆菌（E.dissolvens）超压肠杆菌（E.nimipressualis）
第83页：阴沟肠杆菌革兰染色革兰阴性粗短杆菌
阴沟肠杆菌革兰染色革兰阴性粗短杆菌
阴沟肠杆菌革兰染色革兰阴性粗短杆菌，有周身鞭毛，无芽胞，有些菌株有荚膜。
第84页：阴沟肠杆菌菌落特征(MAC)兼性厌氧
，营养要求不高，在普通培养基上能够生长，形成大而湿润的黏液状菌落，在血琼脂上不溶血，在肠道选择培养基上形成乳糖发酵（呈红色）的菌落。
第85页：IMViC试验大肠埃希菌为++--肠等
IMViC试验大肠埃希菌为++--肠等
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IMViC试验大肠埃希菌为++--肠杆菌属细菌大多为--++动力和鸟氨酸脱羧酶试验肺炎克雷伯菌为阴性肠杆菌属多数为阳性
第86页：肠杆菌属是肠杆菌科中最常见的环境菌群
，医院感染的重要病原菌。在临床微生物室检出率最高的是阴沟肠杆菌和产气肠杆菌，可引起泌尿道感染、呼吸道感染、伤口感染以及败血症。临床意义
第87页：肠杆菌科细菌常产生AmpC酶
，尤以阴沟肠杆菌最为突出。它是导致革兰阴性菌尤其是阴沟肠杆菌对1～3代头孢菌素、单环β-内酰胺类、头霉素类及含酶抑制剂的复合制剂耐药的重要原因。产AmpC酶细菌的治疗，首选4代头孢（头孢吡肟）和碳青霉烯类抗生素。近年来已有质粒介导的AmpC酶出现。
第88页：4157株阴沟肠杆菌对常用抗菌药物的耐等
4157株阴沟肠杆菌对常用抗菌药物的耐药率耐药率(%)亚胺培南头孢哌酮/舒巴坦哌拉西林/他唑巴坦氨苄西林/舒巴坦头孢曲松环丙沙星左氧沙星头孢吡肟头孢呋辛头孢唑啉
