26 第26章 肝炎病毒.pptx

第1页：肝炎病毒

第26章肝炎病毒

第2页：简介

简介

• 肝炎病毒（hepatitis virus）：以侵害肝脏为主的一组病原体
• 病毒性肝炎感染率和发病率非常高
• 属于法定乙类传染病
• 五种：甲型、乙型、丙型、丁型和戊型肝炎病毒

第3页：简介

简介

• 甲型肝炎病毒hepatitis A virus,HAV
• 乙型肝炎病毒hepatitis B virus,HBV
• 丙型肝炎病毒hepatitis C virus,HCV
• 丁型肝炎病毒hepatitis D virus,HDV
• 戊型肝炎病毒hepatitis E virus,HEV

第4页：传染源粪便血液/血源性物质/体液血液/等

传染源粪便血液/血源性物质/体液血液/血源性物质/体液血液/血源性物质/体液粪便传播途径粪-口经皮肤/经黏膜经皮肤/经黏膜经皮肤/经黏膜粪-口慢性感染否是是是否肝炎病毒类型ABCDE基因组类型ssRNA dsDNA ssRNA ssRNA ssRNA

第5页：HAV分类

HAV分类

• Picornaviridae(小RNA病毒科)
• Hepatovirus(肝RNA病毒属)

第6页：HAV临床意义

HAV临床意义

• 粪-口途径传播
• 污染食物、水源、海产品及食具等
• 只有急性期，终身免疫
• 1988年上海HAV流行

第7页：HAV生物学特性

HAV生物学特性

第8页：HAV生物学特性

HAV生物学特性

• VPg：病毒基因组连接蛋白

第9页：HAV生物学特性

HAV生物学特性

• 基因组
  • 单股正链RNA
  • 5′NCR－ORF－3′NCR组成
  • ORF分为P1、P2和P3三个功能区

第10页：HAV实验诊断

HAV实验诊断

• －标本采集
• 免疫学检查：血清或血浆
• HAV抗原检测：粪便
• 病毒颗粒观察
  • 肝活检组织

第11页：HAV实验诊断

HAV实验诊断

• －显微镜检查
• 粪便
  • 直接电镜技术
  • 免疫电镜技术
  • 固相免疫电镜技术

第12页：HAV实验诊断

HAV实验诊断

• －免疫学检测
• 抗体检测
  • IgM型：常用IgM抗体捕捉ELISA检测法
  • IgG型：双份血清，用于流行病学调查、既往感染或疫苗接种效果评价
• 抗原检测
  • ELISA夹心法
  • 难以常规开展

第13页：HAV实验诊断

HAV实验诊断

• 核酸检测
  • 核酸分子杂交
  • 逆转录PCR（RT－PCR）

第14页：HAV实验诊断

HAV实验诊断

• －报告及解释
• 在判断急性、新近或者既往感染
  • 病毒抗原或核酸
  • IgM型抗体
  • IgG型抗体

第15页：HBV分类

HBV分类

• Hepadnaviridae(肝DNA病毒科)
• Hepadnavirus(正嗜肝病毒属)

第16页：HBV临床意义

HBV临床意义

• 血源性传播
  • 输血、注射、外科和牙科手术、针刺等
• 母婴垂直传播
  • 宫内传播
  • 分娩时微小皮损处传播
  • 产后母婴密切接触
• 性传播

第17页：急性乙肝感染的转归高发地区

急性乙肝感染的转归高发地区

以围产期和婴幼儿感染为主低发地区：以成人感染为主围产期感染痊愈~10%慢性化~90%婴幼儿感染痊愈20~50%慢性化50~80%成人感染痊愈95%慢性化5%

第18页：HBV生物学特性

HBV生物学特性

• 大球形颗粒，Dane颗粒
• 小球形颗粒
• 管形颗粒

第19页：HBV生物学特性

HBV生物学特性

第20页：HBV virionThe

infectious virion is called the DANE particle

第21页：Both comprised of

Both comprised of

Both comprised of HBsAg

第22页：HBV生物学特性

HBV生物学特性

• 不完全闭合环状双链DNA
• S、C、P和X 4个ORFs
  • S基因
  • C基因
  • P基因
  • X基因

第23页：HBV生物学特性

HBV生物学特性

• 基因分型（A-H型，共8型）
  • A型常见于欧洲、北美和非洲
  • B型和C型流行于亚洲
  • D型见于全世界
  • E型分布在非洲
  • F型见于南美和阿拉斯加
  • G型见于北美
  • H型存在于中美

第24页：HBV实验诊断

HBV实验诊断

• －标本采集
• 免疫学检查：血清或血浆
• 核酸检测
  • 血清最佳
  • 抗凝剂？

第25页：HBV实验诊断

HBV实验诊断

• －免疫学检测
• HBsAg、抗-HBs、HBeAg、抗-HBe、抗-HBc以及抗-HBc IgM
• 方法
  • ELISA(enzyme-linked immunosorbent assay，最常用，定性)
  • 免疫层析法（胶体金或硒标法）
  • 发光免疫分析(定量)
  • 反相间接血凝试验(少用)

第26页：HBV实验诊断

HBV实验诊断

• －ELISA
• 利用抗原和抗体特异性结合
• 方法
  • 间接法:测定抗-HBs
  • 夹心法：测定HBsAg和HBeAg
  • 竞争法：测定抗-HBc和抗-HBe

第27页：

第28页：HBV实验诊断

HBV实验诊断

• －核酸检测
• 核酸杂交
  • 探针
• PCR
  • 引物
  • Taq DNA聚合酶
  • dNTP

第29页：Denaturation

(940)Annealing (500-550)Extension (680-740)30cycles产物理论上= 2n

第30页：HBV实验诊断

HBV实验诊断

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HBV实验诊断（5）－报告及解释HBsAg抗-HBs HBeAg抗-HBe抗-HBc临床意义急性或慢性感染(大三阳)+-+-++++乙肝后期或慢性感染(小三阳)--++---潜伏期或急性乙肝早期--+++乙肝康复,有免疫力------++-+乙肝康复,有免疫力疫苗接种或乙肝康复,有免疫力

第31页：SymptomsHBeAganti-HB

eTotal anti-HBcIgM anti-HBcanti-HBsHBsAg0481216202428323652100Acute HBV Infection with RecoveryTypical Serologic CourseWeeks after ExposureTitre

第32页：HDV分类和临床意义

HDV分类和临床意义

• Arenavirudae(沙粒病毒科)
• Deltavirus(δ病毒属)
• 与HBV密切相关，属于缺陷病毒，其组装依赖HBsAg
• 传染途径：静脉吸毒、家庭密切接触、输血等
• 同步感染和重叠感染

第33页：HDV生物学特性

HDV生物学特性

• 缺陷病毒

第34页：HDV生物学特性

HDV生物学特性

• 基因组
  • 单股负链RNA病毒
  • 9个ORF，其中ORF5编码HDAg

第35页：HDV实验诊断

HDV实验诊断

• －标本采集
• 免疫学检查：血清或血浆
• 核酸检测：血清最佳
  • 抗凝剂？

第36页：HDV实验诊断

HDV实验诊断

• －免疫学检测
• HDV抗原
  • 去垢剂处理去除HBsAg后
  • 荧光免疫或ELISA检测
• 抗HDV IgM
  • 采用捕捉法ELISA
• 抗HDV总抗体
  • 采用竞争法检测

第37页：HDV实验诊断

HDV实验诊断

• －核酸检测
• RNA是病毒存在的直接证据
• RT－PCR
• 核酸杂交法

第38页：HDV实验诊断

HDV实验诊断

• －报告及解释
• HDAg
  • 主要见于急性丁型肝炎早期
  • 在慢性HDV中，可呈波动性反复阳性
• HDV抗体
• HDV RNA：HDV存在及复制的指标

第39页：HCV分类和临床意义

HCV分类和临床意义

• Flaviviridae(黄病毒科)
• Hepacivirus(肝病毒属)
• 占输血后肝炎的80%~90%
• 传播途径：血液传播、性接触传播、母婴传播、家庭内接触传播等，但约半数途径不明
• 20多个基因型，Ⅰ~Ⅵ型常见
  • 欧美各国流行者多为Ⅰ型
  • 亚洲和我国流行者主要为Ⅱ型

第40页：HCV生物学特性

HCV生物学特性

• 球形，由包膜、衣壳和核心组成

第41页：HCV生物学特性

HCV生物学特性

• 单股正链RNA
• 一个ORF，9个基因区

第42页：HCV实验诊断

HCV实验诊断

• －标本采集
• 免疫学检查：血清或血浆
• 核酸检测：血清最佳
  • 抗凝剂？

第43页：HCV实验诊断

HCV实验诊断

• －免疫学检测
• 筛选试验
  • ELISA法
  • 以C22、C33和NS5区蛋白作为包被抗原
• 确认试验
  • RIBA(重组免疫印迹法)
  • 主要用于ELISA初筛检测可疑者

第44页：HCV实验诊断

HCV实验诊断

• －核酸检测
• RNA是HCV感染的直接证据
• RT-PCR
• bDNA

第45页：HCV实验诊断

HCV实验诊断

• －报告及解释
• 抗-HCV是非保护性抗体
• 抗-HCV阳性仅表明HCV感染
• HCV RNA是HCV早期诊断最有效指标

第46页：抗-HCV筛选

抗-HCV筛选

• 临床意义报告补充实验及结果筛选试验结果未感染过HCV抗-HCV阴性不适合阴性既往或现症HCV感染抗-HCV阳性不做阳性(高S/CO值)既往或现症HCV感染抗-HCV阳性RIBA阳性阳性未感染过HCV抗-HCV阴性RIBA阴性阳性抗HCV和感染状态不能确定；再查抗HCV（>1个月）或做HCV RNA实验抗-HCV不确定RIBA不确定阳性

第47页：抗-HCV筛选

抗-HCV筛选

• 临床意义报告补充实验及结果筛选试验结果活动性HCV感染抗-HCV阳性HCV RNA阳性NAT阳性阳性抗HCV指示既往或现症HCV感染；一次HCV RNA阴性不能排出活动性HCV感染抗-HCV阳性HCV RNA阴性RIBA阳性NAT阴性阳性未感染过HCV抗-HCV阴性HCV RNA阴性RIBA阴性NAT阴性阳性未感染过HCV，抗-HCV筛选结果可能是假阳性抗-HCV不确定HCV RNA阴性RIBA不确定NAT阴性阳性

第48页：HEV分类和临床意义

HEV分类和临床意义

• Hepeviridae (肝炎病毒科)
• Hepevirus(肝炎病毒属)
• 粪-口途径传播
• 污染食物、水源、海产品及食具等
• 只有急性期，终身免疫
• 1986~1988年新疆南部HEV流行

第49页：HEV生物学特性

HEV生物学特性

第50页：HEV生物学特性

HEV生物学特性

• 基因组
  • 单股正链RNA病毒
  • 3个ORF

第51页：HEV实验诊断

HEV实验诊断

• －标本采集
• 免疫学检查：血清或血浆
• 核酸检测：血清最佳
  • 抗凝剂？

第52页：HEV实验诊断

HEV实验诊断

• －免疫学检测
• 抗体检测
  • IgM型：诊断的重要指标，常用IgM抗体捕捉ELISA检测法
  • IgG型：双份血清，用于流行病学调查、既往感染或疫苗接种效果评价

第53页：HEV实验诊断

HEV实验诊断

• －核酸检测
• RT-PCR检测
  • 血清
  • 胆汁
  • 粪便
• 难以临床常规开展

第54页：HEV实验诊断

HEV实验诊断

• －报告及解释
• 判断急性、新近或者既往感染
  • 病毒抗原或核酸
  • IgM型抗体
  • IgG型抗体