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12 第十五章 氨基酸、蛋白质和核酸.ppt

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本课件讲解氨基酸、蛋白质和核酸。先介绍 α-氨基酸的构型、分类与命名及两性电离等电点等性质,再讲多肽与蛋白质的一至四级结构与胶体沉淀变性,最后说明核酸的组成、核苷酸与 DNA 双螺旋结构。

第十五章章节封面,列出氨基酸、多肽、蛋白质与核酸四节并指出氨基酸是蛋白质的基本结构单位
氨基酸定义页,说明羧酸烃基上的氢被氨基取代即为氨基酸且天然蛋白水解所得多为α-氨基酸
α-氨基酸构型页,说明除甘氨酸外α-碳均为手性碳且天然蛋白质水解所得氨基酸几乎都是L构型
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第1页:氨基酸蛋白质和核酸章节封面

15 氨基酸、蛋白质和核酸:蛋白质和核酸是生物高分子化合物,氨基酸是组成蛋白质的基本结构单位。

  • 15.1 氨基酸(amino acid)
  • 15.2 多肽(peptide)
  • 15.3 蛋白质(Proteins)
  • 15.4 核酸(nucleic acid)

第2页:氨基酸的定义

15.1 氨基酸(amino acid):羧酸分子中烃基上的氢原子被氨基取代的产物叫氨基酸。

  • 天然蛋白质水解得到的氨基酸有 30 余种,常见的有 20 种
  • 除脯氨酸外均为 α-氨基酸

第3页:α-氨基酸的构型

一、α-氨基酸的构型、分类和命名

  • 除甘氨酸外,分子中 α-碳均为手性碳原子,有旋光异构体
  • 构型习惯上采用 D/L 法标记;不论含几个手性碳原子,以 α-碳的构型为准
  • 蛋白质水解得到的 α-氨基酸几乎都是 L 构型

示例:L-α-丙氨酸(L-α-氨基酸)与 D-α-氨基酸的对照。

第4页:氨基酸的分类与必需氨基酸

按 R 基分类
脂肪族氨基酸、芳香族氨基酸、杂环氨基酸
按氨基、羧基的数目分类
中性氨基酸(氨基数 = 羧基数)、碱性氨基酸(氨基数 > 羧基数,如赖、组、精)、酸性氨基酸(氨基数 < 羧基数,如谷、天冬氨酸)

必需氨基酸:赖氨酸、色氨酸、苯丙氨酸、苏氨酸、亮氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、缬氨酸。

注:各氨基酸的中文缩写与英文缩写见教材表 15-1。

第5页:氨基酸的物理性质

二、氨基酸物理性质

  • 氨基酸多是无色晶体,熔点一般在 200~300 ℃,比相应的羧酸和胺高
  • 多数氨基酸难溶于有机溶剂而可溶于水,溶解度大小与溶液的 pH 密切相关
  • 除甘氨酸外,α-氨基酸都有旋光性
  • 一些氨基酸具有鲜味

第6页:α-氨基酸化学性质概览

三、α-氨基酸的化学性质

  1. 两性性质和等电点
  2. 与亚硝酸反应
  3. 与甲醛反应
  4. 氧化脱氨反应
  5. 脱羧反应
  6. 配位反应
  7. 与茚三酮反应

第7页:两性性质与偶极离子

1、两性性质和等电点:氨基酸分子中含有氨基和羧基,可与酸反应生成铵盐,又可与碱反应生成羧酸盐,因此氨基酸具有酸、碱两性性质。

内盐(偶极离子)
分子内的氨基和羧基能相互作用形成内盐,内盐同时带有正电荷和负电荷,为偶极离子;氨基酸在结晶状态以偶极离子形式存在

第8页:等电点pI

氨基酸在溶液中受溶液 pH 的影响存在下列平衡:pH > pI 时主要以负离子形式存在,pH = pI 时为偶极离子,pH < pI 时主要以正离子形式存在。偶极离子净电荷为零,在电场中不移动,此时溶液的 pH 值称为等电点(pI)。

三类氨基酸的等电点范围
氨基酸类型等电点 pI
酸性氨基酸2.8~3.2
中性氨基酸5.0~6.3
碱性氨基酸7.6~10.8

第9页:不同pH下的存在形式

练习

  • (1)半胱氨酸(pI = 3.22),在 pH = 9 溶液中的存在形式:负离子
  • (2)精氨酸(pI = 10.8),在 pH = 6 溶液中的存在形式:正离子
  • (3)甘氨酸(pI = 5.97),在 pH = 6 溶液中的存在形式:偶极离子
  • (4)某氨基酸的水溶液 pH = 8,该氨基酸的 pI 大于 8、小于 8 还是等于 8?(答:pI > 8)

第10页:与亚硝酸和甲醛的反应

2、与亚硝酸反应
氨基酸的一种分析方法,测定放出 N2 的量可计算分子中氨基的含量,称 Vanslyke 氨基氮测定法
3、与甲醛反应
氨基酸中的氨基与甲醛发生亲核加成反应,生成 N,N-二羟甲基氨基酸

第11页:氧化脱氨与脱羧反应

4、氧化脱氨反应
在氧化剂的作用下,氨基酸氧化成亚氨基酸后脱去一分子氨生成酮酸
5、脱羧反应
氨基酸在一定条件下可脱去羧基放出二氧化碳

第12页:氨基酸的配位反应

6、配位反应:氨基酸中的羧基可与金属成盐,同时氨基氮原子上的未共用电子对可与某些金属离子形成配价键,生成稳定的配位化合物。

例如与 Cu2+ 能生成蓝色配位化合物结晶,可用于分离或鉴定氨基酸。

第13页:茚三酮反应

7、茚三酮反应:α-氨基酸与水合茚三酮在弱酸性溶液中共热,经氧化、脱氨、脱羧及缩合等反应生成蓝紫色的物质,用于氨基酸的定性和定量分析。

第14页:多肽的分类和命名

15.2 多肽——1、多肽的分类和命名

肽
一分子 α-氨基酸中的氨基和另一分子 α-氨基酸中的羧基缩去一分子水生成的化合物叫肽
分类
2 个 α-氨基酸缩合而成的为二肽,3 个和多个 α-氨基酸缩合而成的肽分别叫三肽和多肽

命名按「某氨酰某氨酰某氨酸」进行,肽链两端分别称为 N 端(氨基端)与 C 端(羧基端)。

第15页:多肽结构的测定

2、多肽结构的测定:多肽是不同的 α-氨基酸按一定顺序结合在一起的。

  • 了解多肽由哪些氨基酸组成:将多肽在酸性溶液中彻底水解,经色层分离后逐个分析
  • 确定氨基酸在肽链中的排列方式:可用端基分析法和部分水解法结合起来确定

第16页:蛋白质的一级结构

15.3 蛋白质(Proteins)——一、蛋白质的结构——1、蛋白质的一级结构

一级结构
各种 α-氨基酸以一定的比例、按一定的顺序通过肽键连接而成的多肽链
  • 蛋白质是分子量很大的多肽;习惯上将相对分子质量在一万以内的肽称为多肽,一万以上称为蛋白质
  • 蛋白质在生物体中承担供给营养、控制代谢、输送氧气、负责机械运动、防御疾病及传递遗传信息等作用

第17页:蛋白质的空间结构

2、蛋白质的空间结构:二级结构、三级结构和四级结构称为蛋白质的高级结构或空间结构。

  • 二级结构指蛋白质多肽链在空间的走向和排布方式,主要有 α-螺旋和 β-折叠片两种形式
  • 蛋白质的三、四级结构目前搞清楚的还很少
  • 研究蛋白质的空间结构对揭示生命本质具有重要意义

第18页:蛋白质的二级结构

蛋白质的二级结构主要包括 α-螺旋与 β-折叠片两种形式。

注:本页正文字符少于 60 字,源文件以空间结构示意图为主,具体图示以原课件图片为准。

第19页:蛋白质的结构总览

本页展示蛋白质一级、二级、三级与四级结构的层次关系。

注:本页正文字符少于 60 字,源文件以结构示意图为主,具体图示以原课件图片为准。

第20页:维持蛋白质空间结构的次级键

3、维持蛋白质空间结构的次级键

蛋白质分子中的主要次级键与化学键
键的类型形成方式
氢键可在肽链间、主链与侧链基团间或侧链基团与侧链基团间形成
疏水键由侧链的疏水基互相接近而形成,包括疏水力和范德华力;疏水力是疏水基避开周围水的一种力
离子键(盐键)带正电荷的侧链与带负电荷的侧链相互接近,通过静电引力形成
二硫键两条多肽链间或同一条多肽链不同部位上的巯基氧化生成
酯键由侧链上的羧基与羟基酯化形成

第21页:蛋白质的两性与等电点

二、蛋白质的化学性质——1、两性性质和等电点:蛋白质和氨基酸一样也具有两性和等电点。

  • 不同的 pH 条件下,蛋白质可主要以正离子、负离子或偶极离子形式存在
  • 调节溶液的 pH,使蛋白质主要成为偶极离子时溶液的 pH 值,就是该蛋白质的等电点

第22页:蛋白质的胶体性质与沉淀

2、蛋白质的胶体性质
蛋白质分子直径在 1~100 nm 之间,溶液具有胶体的通性,如粘滞度高、扩散运动慢、渗透压小、不能透过半透膜等
3、蛋白质的沉淀
分为可逆沉淀与不可逆沉淀两类
  • 可逆沉淀:消除沉淀因素后蛋白质会重新溶于水,仍保持原有生理活性
  • 不可逆沉淀:消除沉淀因素后不能重新溶于水,并失去原有生理活性

第23页:蛋白质的变性

4、蛋白质的变性:蛋白质受物理和化学因素的影响,导致理化性质及生理活性发生改变的过程称为蛋白质变性,变性后的蛋白质称变性蛋白质。

  • 变性蛋白质首先失去生理活性
  • 物理和化学性质也发生改变,如溶解度降低、粘度增大、容易沉淀等
  • 蛋白质的不可逆沉淀一定是蛋白质发生了变性

第24页:蛋白质的颜色反应

5、蛋白质的颜色反应:可用于蛋白质的定性和定量分析。

蛋白质的四种特征颜色反应
反应名称试剂/条件现象
缩二脲反应缩二脲试剂蛋白质与缩二脲一样能发生缩二脲反应
与水合茚三酮反应水合茚三酮,加热生成蓝紫色物质
黄蛋白反应浓硝酸共热,再加碱先呈黄色,加碱后变为橙黄色(含苯环侧链)
米隆反应米隆试剂(硝酸、亚硝酸、硝酸汞、亚硝酸汞混合溶液)生成白色沉淀,加热后变为砖红色,可检查酪氨酸

第25页:核酸的组成

15.4 核酸(nucleic acid)——1、核酸的组成

  • 核酸 → 核苷酸 → 核苷 + 磷酸;核苷 → 戊糖(核糖或脱氧核糖)+ 含氮碱(嘌呤碱或嘧啶碱)
  • 核酸分为核糖核酸(RNA)和脱氧核糖核酸(DNA)
  • RNA 主要存在于细胞质中,参与生物体内蛋白质的合成
  • DNA 主要分布在细胞核中,决定生物体的繁殖、遗传和变异

第26页:核苷酸的命名

2、核苷酸:核苷酸是核酸的基本结构单位。核糖核苷酸为 RNA 的组成单位,脱氧核糖核苷酸是 DNA 的组成单位;生物体内多数核苷酸是 5′-核苷酸。

命名取含氮碱的字头加上「核苷酸」,脱氧核苷酸则在含氮碱的字头前再加「脱氧」两字。

示例:5′-腺苷酸(5′-AMP)、3′-脱氧腺苷酸(3′-dAMP)

第27页:核酸的一级结构

3、核酸的一级结构:核酸是许多核苷酸相互连接而成的多核苷酸长链,指各个核苷酸在核酸分子中的排列顺序。

  • RNA、DNA 中核苷酸之间都是通过 3′,5′-磷酸二酯键相互连接
  • 3′,5′-磷酸二酯键是磷酸分别与相邻两个核苷中戊糖 3′ 位和 5′ 位上的羟基脱水形成的酯键
  • 核酸链的走向一般是从 5′-端至 3′-端

第28页:核酸一级结构示意

本页展示核酸一级结构即多核苷酸链中核苷酸的排列与连接方式。

注:本页正文字符少于 60 字,源文件以结构图示为主,具体图示以原课件图片为准。

第29页:DNA的双螺旋结构

4、DNA 的双螺旋结构(Watson 和 Crick 于 1953 年合作提出)

DNA 双螺旋结构的主要参数
结构特征参数或规律
链的组成两条平行的多核苷酸链围绕同一中心轴以相反走向旋绕成右手双螺旋
旋转周期每隔 10 个碱基旋转一圈
螺距3.4 nm
螺旋直径2.0 nm
碱基配对A 与 T、G 与 C 配对(碱基互补原则),靠氢键固定

第30页:碱基配对

本页展示 DNA 双螺旋中的碱基配对方式:A 与 T、G 与 C 之间通过氢键配对。

注:本页正文字符少于 60 字,源文件以碱基配对示意图为主,具体氢键数目以原课件图片为准。

第31页:DNA双螺旋结构图

本页展示 DNA 右手双螺旋结构的空间形态与两条链的走向。

注:本页正文字符少于 60 字,源文件以结构示意图为主,具体图示以原课件图片为准。

第32页:综合推断题

习题:某化合物 A,分子式为 C8H15O4N3。每摩尔的 A 在甲醛存在下能被一摩尔 NaOH 中和;A 能与 HNO2 作用放出一摩尔 N2,同时得到化合物 B,B 的分子式为 C8H14O5N2;B 在稀酸中水解得到乳酸、丙氨酸、甘氨酸。试推测 A 和 B 的可能结构式,并写出有关反应式。

注:本题为课程综合推断题,解答过程以原课件图片与教材正文为准。

第33页:课程结束

本学期课程结束,谢谢大家。

注:本页为课程结束致谢页,正文字符少于 60 字。

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