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09 第九章 多糖的测定.doc

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本课件讲清多糖测定的三条主线:淀粉测定的酶水解法与酸水解法为何给出不同结果、粗纤维用稀酸稀碱相继共煮的测定原理与步骤,以及果胶物质的重量法沉淀与咔唑比色法定量。

淀粉测定页,说明淀粉作为热量来源与增稠剂的测定意义,比较显微镜物理检验、酶水解法与酸直接水解法在结果上的选择性差异
粗纤维与果胶测定页,说明稀酸稀碱共煮测定粗纤维的原理与五步操作,并列出果胶在果冻、果酱、混浊稳定与解毒方面的用途
果胶测定计算页,给出果胶酸钙重量法计算式中各符号的含义与0.9235换算系数,并说明咔唑比色法基于半乳糖醛酸显色的定量原理
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第1页:淀粉的测定

测定淀粉含量对于决定用途具有重要意义

  • 淀粉是供给人体热量的主要来源。
  • 淀粉在食品中的作用是作为增稠剂、胶体生成剂、保潮剂、乳化剂、粘合剂等。

淀粉的物理检验法:淀粉因品种不同,大小和形状也不同,用显微镜分析法可鉴别不同品种的淀粉。

淀粉含量的测定方法

  • 酶水解法:淀粉用麦芽淀粉酶水解成二糖,再用酸将二糖水解为单糖,然后测定水解所得到的还原糖。常用于液化的淀粉酶是麦芽淀粉酶,它是 α-淀粉酶和 β-淀粉酶的混合物。
  • 酸直接水解法:酸不仅水解淀粉,也能分解半纤维素,产生具有还原力的木糖、阿拉伯糖等单糖,使测定结果较实际含量偏高。
  • 酶水解法的优点:α-淀粉酶具有严格的选择性,只使淀粉液化变成低分子糊精和可溶性糖分,对半纤维素不起作用;除去半纤维素等不溶性残留物后再用酸水解生成葡萄糖,结果比较准确,这种作用叫作选择性水解。

酶水解法测定淀粉的具体步骤

  • 样品处理:将磨碎样品置漏斗中,用乙醚 50 mL 分数次洗涤除去脂肪,再用 10% 乙醇洗去可溶性糖分,先洗 5 次。
  • 酶水解:滤纸上残留物用水移至烧杯内,水浴加热直到淀粉糊化;冷却至 60℃,加麦芽汁 20 mL 在 60℃ 保温 1 小时,再重复加热冷却、保温冷却过滤,滤液定容 250 mL。
  • 酸水解:吸取滤液加入 1:4 硫酸,放在 120—130℃ 油浴中保持沸腾 5—6 min,用 40% NaOH 滴定至碱性。
  • 用费林氏试剂测定葡萄糖含量,同时做空白试验。
  • 计算:淀粉 = [(A − B) × 0.9 × 100] ÷ [W × (50/250) × (V/100)] × 100。A 为样品中淀粉相当于还原糖的重量(mg),B 为空白相当于还原糖的重量,V/100 表示样液酸解后稀释至 100 mL 取 V mL,0.9 为还原糖换算为淀粉的因数,W 为样品重量(g)。

说明:源文本该计算式为线性抽取的连排形式,此处按“分子除以分母后再乘 100”的通行理解补上括号,各符号数值未作改动,建议对照原课件图片确认。

粗纤维测定的引入:植物性食品内含有粗纤维,集中存在于谷类的麸糠、果蔬的表皮及纤维样组织中。从现代营养学观点看,膳食中每天需摄入一定量的膳食纤维,可防止阑尾炎、心脏病和结肠癌等多种疾病。粗纤维含量也是果蔬制品的一项质量指标,可借以鉴定果蔬的鲜嫩度。

青豌豆按鲜嫩度分级的粗纤维含量
等级粗纤维含量(约)
一级1.8%
二级2.2%
三级2.5%

第2页:粗纤维与果胶物质的测定

粗纤维
指动物饲料中那些对稀酸、稀碱难溶、家畜(特别是反刍动物)不容易消化的部分,主要成分是果胶、半纤维素、纤维素和木质素。测定粗纤维可估算食品中不能消化的部分,评定其营养价值与经济价值。
膳食纤维
指人们的消化系统或消化系统中的酶不能消化、分解、吸收的物质,包括纤维素、半纤维素、木质素、果胶物质。

粗纤维的测定:常用方法是将热的稀酸、稀碱与样品相继共煮,并分别经过滤、洗涤残留物等操作。酸可将淀粉、果胶物质和部分半纤维素水解除去;碱能溶解除去蛋白质、部分半纤维素及部分木质素,还除去脂肪。

测定原理:在硫酸作用下,样品中的糖、淀粉、果胶质和半纤维素水解除去后,再用碱处理除去蛋白质和脂肪酸,残留物为粗纤维;如其中含有不溶于酸、碱的杂质,可灰化后除去。

具体步骤

  • 取 20—30 g 捣碎样品移入 500 mL 锥形瓶,加入 200 mL 煮沸的 1.25% 硫酸溶液,维持 30 min。
  • 过滤(亚麻布),用沸水洗至洗液不呈酸性。
  • 再用 200 mL 煮沸的 12.5 g/L KOH 将麻布上残留物洗入原锥形瓶中,煮沸 30 min,取下过滤、洗涤,放入重熔坩埚(漏斗)中抽滤,再依次用乙醇和乙醚洗涤一次。
  • 将坩埚和内容物放在 105℃ 烘箱中烘干称重至恒重。
  • 计算:x% = G ÷ m × 100,G 为残余物的质量,m 为样品重量。

果胶物质的测定

果胶物质是一种植物胶,可作为食品生产中的胶冻材料和增稠剂,用途甚广。

果胶主要用途

  • 用果胶制造果冻和糖果。
  • 果胶物质是影响果酱制品稠度和凝冻性的重要因素。
  • 果胶在柑桔汁生产中对混浊体起稳定剂作用;在医药上也有重要意义。
  • 可作为治疗胃肠道及胃溃疡等疾病的良好药剂。
  • 果胶(特别是低甲氧基果胶)能与铅、汞等有害金属形成人体不能吸收的溶解物,可用作金属中毒的良好解毒剂和预防剂。

重量法:用沉淀剂使果胶物质沉淀析出后测定重量。沉淀剂有两类:电解质(如氯化钠、氯化钙)与有机溶剂(如甲醇、乙醇、丙酮等)。

测定步骤

  • 准确称取新鲜样品,加水煮沸一小时,冷却后定容 250 mL。
  • 过滤吸取滤液 25 mL,加入 0.1 mol NaOH 溶液 100 mL,再加入 50 mL 1 mol 醋酸溶液和 50 mL 2 mol CaCl2 溶液,加热沸腾 5 min 后立即用烘干至恒重的滤纸过滤,用热水洗。
  • 把带滤渣的滤纸放在预先烘干至恒重的称量瓶内,置 105℃ 烘箱中烘至恒重。
  • 计算:果胶质(%)= (0.9235 × G) ÷ [W × (25/250)] × 100。

第3页:果胶重量法计算与咔唑比色法

果胶重量法计算式的符号含义

  • G — 滤渣重量(克)= W1 − W2
  • W — 样品重量(克)
  • W1 — 果胶酸钙重和玻璃灯芯漏斗的重量
  • W2 — 玻璃灯芯漏斗的重量
  • 0.9235 — 果胶酸钙换算为果胶质的系数

咔唑比色法:基于果胶物质水解生成的半乳糖醛酸在强酸中与咔唑发生缩合反应,生成紫红色化合物,其呈色强度与半乳糖醛酸浓度成正比,可进行比色定量测定。

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