页数：100页文件大小：3.51 MB来源： 食品微生物检验技术ppt课件
本课件讲解培养基与基本操作技术，先说明氮源、碳源、凝固剂、抑制剂与指示剂的作用，再区分增殖、选择与鉴别培养基并给出制备要点，随后演示无菌室与超净台的无菌操作、接种分离、需氧与厌氧培养方法。
第三章培养基和实验基本操作技术
一、培养基中的主要成分及其作用（一）、营养物质N源、C源、无机盐、生长因子、水第一节培养基
1、常用的N源物质蛋白胨牛肉膏肉浸汁酵母膏
（1）蛋白胨有：普通蛋白胨示胨胰蛋白胨
（2）、牛肉浸液成份：含氮物：肌酸、嘌吟、核苷酸尿酸肌肽等糖类物质：葡萄酒3肝糖、P-已糖生长因子：硫胺、核黄素、泛酸、叶酸等8种B族维生素
2、糖、醇类物质单糖：葡萄糖、果糖、半乳糖、甘露糖双糖：蔗糖、麦芽糖、乳糖多糖：淀粉、纤维素、菊糖醇类：甘露醇、卫茅醇、甘油
（二）、水用蒸馏水，不能用自来水
（三）、凝固剂琼脂、明胶、血清等要求：清一色、杂质少
（一）、根据培养基的物理状态来区分固体培养基液体培养基半固体培养基
1、液体培养基主要用于增菌培养、鉴别性培养
2、固体培养基用作微生物的分离、鉴定、检验杂菌、计数、保藏、生物测定等
3、半固体培养基观察微生物的动力，有时用来保藏菌种。
（二）、根据培养基的用途来区分增殖培养基选择培养基鉴别培养基
1、增殖培养基在普通培养基中加入一些某种微生物特别喜欢的营养物质，以增加这种微生物的繁殖速度，逐渐淘汰其它微生物，这种培养基称为增殖培养基。
增菌与运送用培养基的名称及用途：下表列出相关数据。
| 编号 | 培养基名称 | 用途 |
|---|---|---|
| B2 | 胆盐乳糖培养基（BL） | 大肠杆菌增菌 |
| B3 | 亚硒酸盐增菌培养基 | 沙门氏菌增菌 |
| B4 | 亚硒酸盐半胱氨酸增菌培养基 | 食品中沙门氏菌增菌 |
| B5 | 四硫磺酸钠亮绿基础培养基 | 沙门氏菌增菌 |
| B6 | GN肉汤培养基 | 志贺氏菌增菌 |
| B7 | 碱性蛋白胨水培养基 | 霍乱弧菌增菌 |
| B8 | 7.5%氯化钠肉汤培养基 | 金黄色葡萄球菌增菌 |
| B9 | 缓冲蛋白胨水培养基 | 沙门氏菌增菌 |
| B10 | 血液增菌培养基 | 血液中细菌增菌 |
| B11 | SCDLP液体基础培养基 | 化妆品中细菌增菌 |
2、选择培养基在培养基中加入某种物质以杀死或抑制不需要的菌种生长的培养基，称之为选择培养基。
分离培养用选择培养基的名称及用途：下表列出相关数据。
| 培养基名称 | 用途 |
|---|---|
| SS琼脂培养基 | 沙门氏菌和志贺氏菌属分离 |
| HE琼脂培养基 | 志贺氏菌分离鉴别 |
| 伊红美蓝琼脂培养基 | 大肠杆菌、产气杆菌分离鉴别 |
| 麦康凯琼脂培养基（MacC） | 肠道致病菌分离 |
| 甘露醇高盐琼脂培养基 | 绿脓杆菌分离鉴别（原文如此） |
| XLD琼脂培养基 | 原文未列用途 |
数据存疑提示：甘露醇高盐琼脂在常规检验中多用于葡萄球菌的选择分离，此处原文标注为绿脓杆菌分离鉴别；XLD琼脂培养基一行的用途在源文件中缺失。以上按原文保留，建议对照原课件核对后修订。
鉴别用培养基的名称及用途：下表列出相关数据。
| 培养基名称 | 用途 |
|---|---|
| 蛋白胨水培养基 | 靛基质和霍乱红试验 |
| 乳糖胆盐发酵培养基 | 大肠杆菌发酵乳糖试验 |
| 0.5%乳糖发酵培养基 | 肠道菌生化试验（复发酵） |
| 半固体培养基 | 动力试验和菌种保存 |
| 三糖铁琼脂培养基（TST） | 肠杆菌糖发酵及硫化氢反应 |
| 氰化钾基础培养基 | 原文未列用途 |
数据存疑提示：氰化钾基础培养基的用途在源文件中缺失，按原文保留待补。
（三）培养基制备的基本方法和注意事项培养基的制备记录培养基成分的称取培养基各成份的混合和溶化培养基pH的初步调正培养基的过滤澄清培养基的分装培养基的灭菌培养基的质量测试培养基的保存
5、培养基的过滤澄清液体培养基可用滤纸过滤法琼脂培养基,可用中间夹有薄层吸水棉的双层纱布过滤
培养基的分装量要求：下表列出相关数据。
| 分装形式 | 装量 |
|---|---|
| 斜面 | 1/5管 |
| 半固体培养基 | 1/3管 |
| 高层斜面 | 1/4～1/3管 |
| 平板 | 13～15ml |
培养基配制–器材培养基、玻璃器皿天平秤、药匙
培養基配製–儀器杀菌锅(Autoclave)无菌操作台(Laminar flow)
培養基配製–溶解培養基傾倒培養基時小心不要沾到玻璃壁上
放入杀菌锅(Autoclave)灭菌培養基配製–灭菌
加水蓋過鐵板放東西關門調整溫度時間關緊洩壓閥注意事項–杀菌锅的使用
注意事項–殺菌釜使用滅菌結束後，等壓力降回零時才可打開門進入殺菌釜之物品，蓋子不可關太緊或太鬆
注意事項–殺菌釜使用拿滅菌後物品請記得帶耐熱手套
培養基配製–平板培養基滅過菌之固態培養基於無菌操作台(Laminar flow)內倒製平板培養基(Plate)日光燈UV燈風扇
第二节、微生物检验的基本操作技术
主要内容无菌技术M的接种与分离技术微生物的培养方法微生物的生长现象与观察
（一）什么是无菌技术指在微生物实验工作中，控制或防止各类微生物的污染及其干扰的一系列操作方法和有关措施。
（二）无菌环境无菌室无菌柜超净工作台
（三）无菌器材灭菌器材：玻璃器皿、培养基、无菌衣等.消毒器材：无菌室内的凳子、试管架、天平、工作台、手等
1. 接種環前端鐵絲部分以酒精燈烧红来菌，後端鐵棒部分過火无菌操作–取菌技巧1
4. 試管傾斜，放入接種環無菌操作–取菌技巧1
2. 自Plate上取單一菌落(方法一：蓋子微開遮住培養基，避免空氣中菌體掉入)(方法二：plate 反面拿起)无菌操作–取菌技巧2
5. 慢慢釋放按鈕，即可吸取液體无菌操作–取菌技巧4
方法一：以接種環沾菌，放入新的培養基中接菌方法三：以Pipetman吸取菌液，按鈕壓至最底排出菌液方法二：以安全吸球吸取菌液，放入新的培養基中，向下排出菌液无菌操作–接菌技巧
操作時離火源遙遠試管直放，空氣中菌體容易掉入無菌操作–錯誤示範
無菌操作–錯誤示範安全吸球倒放，菌液容易流入吸球內安全吸球隨意放置桌面，菌液容易流出至桌上
無菌操作–錯誤示範Pipetman 倒放，菌液容易流入Pipetman 內
注意事項–生物性廢棄物生物性廢棄物放至正確位置以便滅菌
二、微生物的接种与分离技术
（一）、接种将微生物接到适于它生长繁殖的人工培养基上或活的生物体内的过程叫做接种。
常用的接种方法有以下几种：１）划线接种２）三点接种３）穿刺接种４）浇混接种
５）涂布接种６）液体接种７）注射接种８）活体接种
(二)、分离纯化
１、倾注平板法
本页为倾注平板法与涂布平板法图解，源文件仅保留图注编号，需对照原图补充示意说明。
三、微生物的培养方法一般培养法（需氧培养）厌氧培养法CO2培养法
（一）、一般培养法（需氧培养）培养温度:25~37℃
C、厌氧手套箱
二氧化碳培养箱
二氧化碳培养法
加油呀
下载地址：{{downurl}}
{{{a}}}
{{#b}}{{{b}}}
{{/b}} {{/title}} {{#nolog}}登陆注册
{{/nolog}} {{#djsx}}点我刷新
{{/djsx}} {{#gocz}} {{/gocz}} {{#ffqr}} {{/ffqr}}