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02 第二章 食品微生物检验常用的仪器.ppt

页数:71页文件大小:3.28 MB来源: 食品微生物检验技术ppt课件

本课件讲解食品微生物检验常用仪器,涵盖显微镜的保养、培养箱与水浴锅的配置、匀质器与超净工作台的使用、离心机类型与转子的选择、干热与湿热灭菌操作,以及各类玻璃器皿的清洗与灭菌方法。

第二章封面,标示本章讲解的显微镜、培养箱、灭菌器、离心机等常用仪器与玻璃器材
常用仪器清单,包括显微镜、冰箱、超净工作台、杀菌锅、离心机、水浴锅、培养箱、烘箱与匀质器
显微镜使用与保养要点,说明油浸镜头擦拭、物镜复位与罩防尘套的操作顺序
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第1页:第二章 食品微生物检验常用的仪器 封面

第二章食品微生物检验常用的仪器

第2页:常用仪器及其使用

一、常用仪器及其使用•显微镜•冰箱•超净工作台、杀菌锅•离心机•水浴锅、培养箱•烘箱或干燥箱•匀质器•各种玻璃器材

第3页:显微镜

(一)显微镜

第4页:普通显微镜的保养

  • 普通显微镜的保养
  • 观察完后,移去观察的载玻片标本。
  • 用过油浸镜的,应先用擦镜纸将镜头上的油擦去,再用擦镜纸蘸着擦镜液擦拭2—3次,最后再用擦镜纸将二擦镜液苯擦去。
  • 转动物镜转换器,放在低倍镜的位置。
  • 将镜身下降到最低位置,调节好镜台上标本移动器的位置,罩上防尘套。

第5页:数字显微镜

数字显微镜

第6页:

第7页:培养箱的类型

  • (二)、培养箱
  • 智能隔水恒温培养箱
  • 隔水培养箱
  • 电热培养箱
  • 生化培养箱

第8页:普通恒温培养箱

  • 卧式恒温振荡培养箱电热恒温培养箱
  • 普通恒温培养箱

第9页:智能培养箱•微电脑智能化双目控温系统具有

  • 智能培养箱•微电脑智能化双目控温系统具有控温保护、准确、可靠。
  • 工作温度任意调节并具有偏差报警功能,镜面不锈钢内胆,外门内层用一层门,观察箱内情况时不影响箱内温度。
  • 9000系列隔水式加热方式,具有温度均匀且断电后仍能保持较长时间恒温。

第10页:隔水式培养箱•隔水式培养箱数字控温

  • 隔水式培养箱•隔水式培养箱数字控温,不锈钢内胆,俗称水夹套培养箱。
  • 温度均匀,断电后仍能保持较长时间恒温。

第11页:电热恒温培养箱

电热恒温培养箱

第12页:生化培养箱

2、生化培养箱

第13页:二氧化碳培养箱

3、二氧化碳培养箱

第14页:培养箱的配置和使用

  • 培养箱的配置和使用配置:22(℃)、30(℃)、37(℃)培养箱各一个使用注意事项:
  • 箱内不能放入过热或过冷的物品,取放物品时应快速进行并做到随手关闭箱门。
  • 内放一杯水,以保持湿度。
  • 培养物不能放在最底层,也不得放置过于拥挤。
  • 每月消毒一次,先用3%的来苏尔液涂布消毒,再用清水擦净。
  • 不得当烘箱使用。

第15页:

第16页:水浴锅的配置和使用

  • 水浴锅(1)37 ℃和42 ℃水浴锅24小时工作
  • 其余水涡锅用后关掉电源
  • 水浴锅内应注加蒸馏水而非自来水,使用时请注意水位。配置:37 ℃、42 ℃、56 ℃各一个

第17页:

第18页:匀质器

匀浆机(三)匀质器

第19页:高速匀浆机无菌均质器无菌均质器该均质器广

高速匀浆机无菌均质器无菌均质器该均质器广泛用于动物组织、生物样品、食品、化妆品的均质处理,特别适合于微生物检测样本的制备,具有均质柔和、样品无污染、无损伤、不升温、不需灭菌处理、不需洗刷器皿的特点,样本装在特制的一次性无菌均质袋中,不与仪器接触,预防交叉污染。

第20页:超净工作台的三大类型

(四)、超净工作台三大类型:侧流式、直流式和外流式

第21页:垂直流超净工作台

垂直流超净工作台

第22页:水平单向流洁净工作台

水平单向流洁净工作台

第23页:超净台的使用和注意事项

  • 超净台的使用和注意事项
  • 使用前先打开紫外灯照射,紫外线照射时间40~60分钟
  • 使用中,有机玻璃罩受到污染,严禁用酒精棉球擦拭,请用含水棉布檫拭
  • 请保持超净台整洁,不要堆积杂物
  • 使用完毕,勿忘关闭煤气开关或酒精灯
  • 请做好使用记录。
  • 如遇故障,除记录在册外,还应及时与有关人员联系,尽早排除故障。
  • 学期开始做无菌试验一次,以保证净化台正常使用。平时可根据情况,定期做无菌试验,以测定净化台是否符合无菌要求。

第24页:离心机的类型

(五)、离心机•离心机的类型:•普通离心机•高速离心机•超速离心机

第25页:类型普通离心机高速离心机超速离心机最大转

三类离心机的性能与应用对比:下表列出相关数据。

普通离心机、高速离心机与超速离心机的性能及应用对比
类型最大转速(r/min)最大RCF(g)分离形式转子仪器结构性能和特点应用
普通离心机60006000固液沉淀角式和外摆式转子速率不能严格控制,多数室温下操作收集易沉降的大颗粒(如红细胞、酵母细胞等)
高速离心机2500089000固液沉淀分离角式、外摆式转子等有消除空气和转子间摩擦热的制冷装置,速率和温度控制较准确、严格收集微生物、细胞碎片、大细胞器、硫酸铵沉淀物和免疫沉淀物等;不能有效沉淀病毒、小细胞器(如核糖体)、蛋白质等大分子
超速离心机可达75000以上可达510000以上密度梯度区带分离或差速沉降分离角式、外摆式、区带转子等备有消除转子与空气摩擦热的真空和冷却系统,有更为精确的温度和速度控制、监测系统及传动制动装置主要分离细胞器、病毒、核酸、蛋白质、多糖等,甚至能分开分子大小相近的同位素标记物

说明:最大RCF数值按源文件原样保留(超速离心机510000 g),如需与现行仪器参数核对请对照原课件。

第26页:台式高速冷冻离心机

台式高速冷冻离心机

第27页:

第28页:

第29页:差速沉降(沉淀)法

差速沉降(沉淀)法:密度梯度离心法:

第30页:转子许多离心机可以配用不同大小的离心管

  • 转子许多离心机可以配用不同大小的离心管,只需要改变转子或使用一个与不同的吊桶/适配器相配的转子。•
  • 水平转子:盛样品的离心管放在吊桶内,以转子的加速度运转。水平转子用于低速离心机,其主要缺陷是延长了沉淀的路径。同时,减速过程中产生的对流会引起沉淀物的重新悬浮。•
  • 角式转子:许多高速离心机及微量离心机安装。由于沉降路径短,沉淀颗粒时角式转子比水平转子的效率更高。•
  • 垂直管转子:用于高速及超高速离心机进行等密度梯度离心时。这种转子在沉淀没有形成之前不能用来收集悬浮液中的颗粒。转子:(a)水平转子;(b)固定转角转子;(c)垂直离心管转子

第31页:灭菌器的种类

(六)、灭菌器•干热灭菌器•湿热灭菌器

第32页:电烘箱(干燥箱)用途

  • 1、电烘箱(干燥箱)用途:用于玻璃器皿等耐热物品的烤干和灭菌。
  • 玻璃器皿等物的灭菌,温度160~165℃,灭菌2小时。

第33页:

第34页:玻璃器材的干热灭菌方法

  • 玻璃器材的干热灭菌方法
  • 将培养皿、吸管等玻璃器皿洗净干燥后,用报纸包好,或装入特制的铁筒中。
  • 将包装好的玻璃仪器摆入电热烘箱中,彼此间留有一定的空隙以便流通空气。
  • 关紧箱门,打开排气孔接上电源。
  • 待箱内空气排出到一定程度时,关闭上排气孔,继续加热至一定温度后,调节温度控制旋钮固定温度,在160℃—165℃保持2小时即可。
  • 待自然降温冷却后(60℃以下)才能开门取出玻璃器皿。

第35页:高压灭菌锅•用途

  • 2、高压灭菌锅•用途:培养基、生理盐水、废弃物、采样器、纱布、衣物的灭菌。
  • •种类:手提式、立式、卧式杀菌锅

第36页:不锈钢手提式压力蒸汽灭菌器

不锈钢手提式压力蒸汽灭菌器(电热)全自动高压灭菌器

第37页:

第38页:大型高压蒸汽杀菌锅的基本操作方法1.放干

  • 大型高压蒸汽杀菌锅的基本操作方法
  • 放干消毒锅内的剩余水,加入纯净水至最高水位
  • 放入物品,关上消毒锅门;冷凝阀开1圈;消毒钮顺时针拨至“关”
  • 选择所需的杀菌压力0.07、0.11或0.14Mpa后;开启电源
  • 当温度达到100℃左右时就可将消毒钮顺时针拨至“消毒”及冷凝阀关至刚好有冷凝水和蒸气冒出为止
  • 当消毒室温度达到所需温度时开始计时,到时间后关闸。

第39页:高压蒸汽杀菌锅的注意事项

  • 使用高压蒸汽杀菌锅的注意事项A:为避免烫伤,只有当温度降低到70℃以下时放可小心的打开消毒锅门。B:为避免消毒锅冷却后消毒室内产生负压而打不开消毒锅门,所以当消毒室温度低于70℃时就可慢慢把门打开。C:根据消毒物品选择排气方式:
  • .如有液体(营养液等)请选择慢排。
  • .如只有废品等可选择快排。

第40页:手提式高压蒸汽灭菌锅的使用方法

  • 手提式高压蒸汽灭菌锅的使用方法
  • 、关好排水阀门放入清水至标度为止。
  • 、将要灭菌的物品用牛皮纸盖好后放入灭菌锅中,关上器盖。
  • 、通电加温,同时打开排气活门,排尽锅内的空气,再关闭活门。
  • 、当达到所需温度时开始计时,并在此温度下保持所需的时间。

第41页:稍微打开一点排气活门,使锅内蒸气缓慢排

  • 、稍微打开一点排气活门,使锅内蒸气缓慢排除。
  • 、当压力表指针降到零、锅内蒸气完全排尽时,立即打开锅盖取出物品。
  • 、最后将高压灭菌器内的剩余水排出。

第42页:本章思考题

思考题•干热灭菌和高压蒸汽法适用范围如何? •电热烘箱和高压锅如何操作? 各有哪些使用注意事项?

第43页:滤菌器

3、滤菌器

第44页:MF75快速抽滤器方便过滤1000ml容

  • MF75快速抽滤器方便过滤1000ml容量的培养液、缓冲液等,可直接保存和分装。
  • 可高温灭菌。
  • Nalgene 可反复用抽滤装置

第45页:普通冰箱冰柜的使用

  • (七)、普通冰箱冰柜
  • 取用冰箱冰柜内物品尽可能快,取完后及时将有用物品放回原处
  • 关冰柜门时应轻轻合上,同时将门轻轻往外拉一下检查是否关好
  • 冰柜内的不要样品应及时清理。

第46页:

第47页:菌落计数器自动细菌菌落测定分析仪

菌落计数器自动细菌菌落测定分析仪

第48页:可直接测读菌体本身在培养液中造成的导电度

  • 可直接测读菌体本身在培养液中造成的导电度变化,或利用菌体在代谢过程中的产物所造成的导电度变化,快速测定样品中细菌含量数目。
  • 适用于各种食品,制药,石化工厂的微生物品质管理,取代传统方法将侦测时间由3-5天减到几个小时。亦可用于做样品的抗菌性试验。快速自动菌数导电测定仪

第49页:细胞的总数

  • 细胞的总数、细胞的直径、平均直径、细胞浓度等。
  • 仪器全自动操作,避免人工操作的误差,数据精确,省时省力。
  • 是您作细胞研究的好助手,是研究细胞的更高层次的选择细胞/颗粒分析计数仪空气微生物检测仪

第50页:适合CGMP药厂

适合CGMP药厂, 食品加工厂, 医院手术防, 无尘无菌室室Class100~100000 之等级微粒子落塵计数器

第51页:常用玻璃仪器及用具

二、常用玻璃仪器及用具

第52页:移液管的规格

1、移液管1ml,2ml,5ml,10ml,25ml(一)量器类

第53页:容量瓶的规格

2、容量瓶50ml,100ml,250ml,500ml,1000ml

第54页:量筒容量

3、量筒容量(ml)10、25、50、10、25、500、1000、2000

第55页:微量取样器的类型

  • 固定体积移液器数字型可调移液器P型
  • 微量取样器

第56页:其他常用玻璃器皿

(二)、其他常用玻璃器皿

第57页:5cm

3.5cm,7cm,9cm,15cm1、培养皿

第58页:试管

2、试管

第59页:

第60页:各种试管的用途

各种试管的使用•13mmX100mm:生化反应及凝集反应•15mmX150mm:斜面培养•18mmX180mm:检样稀释

第61页:三角瓶的规格

型号150ml,200ml,250ml,500ml,1L,2L,3L3、三角瓶

第62页:烧杯容量(ml)

烧杯容量(ml):30、50、100、150、250、400、600、1000、2000、3000

第63页:玻璃器皿的清洗和灭菌

  • 三、玻璃器皿的清洗和灭菌(一)、新购的玻璃器皿
  • 先用热肥皂水刷洗,流水冲净。
  • 再浸泡于1~2%的盐酸中数小时,最后用流水冲净。

第64页:用过的玻璃器皿

(二)、用过的玻璃器皿

第65页:含油脂器材的清洗(1)、单独高压灭菌

  • 含油脂器材的清洗
  • 、单独高压灭菌
  • 、趁热倒去污物
  • 、倒放在铺有吸水纸的篮子上,置100 ℃烘箱中烤0.5h
  • 、再用5%的碳酸氢钠水煮两次,再用肥皂水刷洗干净。

第66页:含菌试管的清洗•高压灭菌后

2、含菌试管的清洗•高压灭菌后,肥皂水刷洗干净,烘干或晾干备用。

第67页:含菌平皿的灭菌

  • 含菌平皿的灭菌
  • 、底盖分开放,放入桶中,高压灭菌
  • 、趁热倒去污物
  • 、肥皂水刷洗干净,烘干或晾干备用。

第68页:含菌吸管的清洗

  • 含菌吸管的清洗
  • 、把含菌吸管投入3%的来苏尔液内浸泡30min以上杀菌
  • 、用肥皂水洗涤一次
  • 、最后用清水冲洗干净即可。

第69页:载玻片及盖玻片的清洗

  • 载玻片及盖玻片的清洗
  • 将载玻片及盖玻片分别浸入5 %的来苏尔液内浸泡过夜,取出水洗干净
  • 盖片用软布擦干即可
  • 染色用的载玻片要放入肥皂水中煮沸10min,再用肥皂水刷洗干净,最后用95%的酒精浸泡片刻,晾干备用。

第70页:玻璃器材的灭菌(1)清洗后烘干

  • (三)、玻璃器材的灭菌
  • 清洗后烘干
  • 加塞包扎
  • 灭菌:干热灭菌:160 ~165℃烘箱中烤2h湿热灭菌:121 ℃20min

第71页:本章思考题

  • 思考题
  • 在微生物实验室中如何配置培养箱,使用中要注意哪些问题?
  • 在微生物实验室中如何配置水浴锅,使用中要注意哪些问题?
  • 如何正确使用超净台?
  • 如何正确使用干热灭菌方法对玻璃器材进行灭菌?
  • 简述手提式高压蒸汽灭菌锅的使用方法
  • 如何进行玻璃器皿的清洗和灭菌?
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