页数:44页文件大小:1.68 MB来源: 食品检验技术ppt课件
本课件讲解食品中碳水化合物的测定。先介绍单糖双糖多糖的分类、显色与还原性性质及提取澄清方法;再重点讲解还原糖的直接滴定法与高锰酸钾法的原理、试剂、样品处理与计算;最后说明蔗糖水解测定、总糖的直接滴定与蒽酮比色法,以及淀粉酸水解后折算的测定。
本课件继续第四章《食品的一般成分分析》,本部分讲解第五节碳水化合物的测定。
第五节 碳水化合物的测定
一、概述
(二)性质
2、可溶性糖类的澄清:下表列出常见干扰物质与实验室常用的澄清剂。
| 类别 | 具体物质 |
|---|---|
| 干扰物质 | 色素、蛋白质、可溶性果胶、可溶性淀粉、有机酸、氨基酸、单宁 |
| 实验室常用的澄清剂 | 乙酸锌和亚铁氰化钾溶液、硫酸铜和氢氧化钠溶液、中性醋酸铅、碱性醋酸铅、Al(OH)₃乳剂、活性碳 |
二、还原糖的测定
1、原理:碱性酒石酸铜甲液+碱性酒石酸铜乙液 → 蓝色氢氧化铜沉淀+酒石酸钾钠 → 深蓝色的可溶性酒石酸钾钠铜络合物;加入次甲基蓝指示剂后,样液中的还原糖与其反应生成红色的氧化亚铜与还原态次甲基蓝(无色)。
3、试剂
4、测定步骤
(1)乳类、乳制品及含蛋白质的冷食类
取约2.50~5.00g固体样品(吸取25.00~50.00mL液体样品)于250mL容量瓶,加50mL水摇匀,加5mL乙酸锌、5mL亚铁氰化钾溶液,加水定容,混匀,沉淀静置30min后过滤,取滤液。
(2)含酒精饮料:吸取100mL样品于蒸发皿,用1mol/L氢氧化钠溶液中和,在水浴上蒸发至原体积的1/4,移入250mL容量瓶,用水定容。
(3)含多量淀粉的食品:称取10~20g样品,加200mL水,于45℃水浴中加热1h,时时振摇,移入250mL容量瓶用水定容,混匀,静置沉淀后过滤,取滤液。
(4)汽水等含有CO₂的饮料:吸取100mL样品于蒸发皿,在水浴上除去CO₂,移入250mL容量瓶,用水定容。
5、结果计算 1)碱性酒石酸铜溶液浓度
F = C · V
式中:F——10mL碱性酒石酸铜溶液相当于还原糖的质量,mg;C——葡萄糖标准液的浓度,mg/mL;V——标定时平均消耗葡萄糖标准液的总体积,mL。
2)样品中还原糖的计算
还原糖(%)= F × 250 /(m × V)× 100 / 1000
式中:m——样品质量,g;F——10mL碱性酒石酸铜溶液相当于葡萄糖(以葡萄糖计)的质量,mg;V——测定时平均消耗样品溶液的体积,mL;250——样品溶液的总体积,mL。
6、说明与讨论
1、原理:样品溶液+过量的碱性酒石酸铜溶液 → Cu₂O↓;Cu₂O + Fe₂(SO₄)₃ + H₂SO₄ → 2CuSO₄ + 2FeSO₄ + H₂O;10FeSO₄ + 2KMnO₄ + 8H₂SO₄ → 5Fe₂(SO₄)₃ + 2MnSO₄ + K₂SO₄ + 8H₂O。
3、试剂及器材
4、样品处理:样品处理方法同直接滴定法,但所使用的澄清剂为10mL碱性酒石酸铜甲液+4mL 40g/L的氢氧化钠溶液。
5、测定:取50mL样品处理液于400mL烧杯,加碱性酒石酸铜甲、乙液各25mL,盖上表面皿,在4分钟内沸腾,沸腾2分钟;趁热用坩埚抽滤,用60℃热水洗涤烧杯及沉淀至洗液不呈碱性;加25mL硫酸铁溶液、25mL水,用玻璃棒搅拌使氧化亚铜完全溶解,用高锰酸钾标准溶液滴至微红色。
空白试验:吸取50mL水代替样液进行。
X =(V − V₀)× C × 71.54
式中:X——样品中还原糖质量相当于氧化亚铜的质量,mg;V——测定用样品溶液消耗高锰酸钾标准溶液的体积,mL;V₀——试剂空白消耗高锰酸钾标准溶液的体积,mL;C——高锰酸钾标准溶液的浓度,mol/L;71.54——1mL高锰酸钾标准溶液〔c(1/5 KMnO₄)=1.000mol/L〕相当于氧化亚铜的质量,mg。
再由氧化亚铜质量查表得还原糖质量m₁,按下式计算:还原糖(g/100g)= m₁ × 250 /(m₂ × V)× 1/1000。
7、说明与讨论
三、蔗糖的测定 (一)蔗糖测定意义
(二)蔗糖的测定 1、原理:样品经脱脂、用澄清剂除去蛋白质等杂质,得到水或乙醇提取液;提取液经盐酸水解使蔗糖转化为还原糖,再分别测定水解前后的还原糖,由差值计算蔗糖含量。
2、试剂
3、测定步骤:样品预处理后得样品处理液;取50mL样液直接测定还原糖;另取50mL样液,加5mL 6mol/L盐酸,于68~70℃水浴15min,用20%NaOH中和后定容至100mL,再测定还原糖。
蔗糖(%)= F ×(1/V₂ − 1/V₁)× 0.95 × 100 / m × 稀释体积换算
式中:F——10mL酒石酸钾钠铜溶液相当于转化糖的质量,mg;V₂——测定时消耗未经水解的样品稀释液体积,mL;V₁——测定时消耗经过水解的样品稀释液体积,mL;m——样品质量,g;0.95——转化糖换算为蔗糖的系数。
(2)高锰酸钾法:水解前后分别按高锰酸钾法测定还原糖,查出相当的还原糖质量,以水解后与水解前的差值乘以0.95换算为蔗糖含量。
1、直接滴定法:预处理得到样品提取液,经盐酸水解转化为还原糖液,再用直接滴定法测定还原糖含量,即为总糖含量。
总糖(%)= F × V₁ /(m × V₂)× 100 / 1000
式中:F——10mL碱性酒石酸铜溶液相当的转化糖质量,mg;V₁——样品处理液总体积,mL;V₂——测定时消耗样品水解液体积,mL;m——样品质量,g。
2、蒽酮比色法 (1)原理:单糖+浓硫酸 → 糠醛衍生物;糠醛衍生物+蒽酮 → 蓝绿色的化合物,于620nm测定吸光度。
总糖(以葡萄糖计,%)= c × 稀释倍数 × 10⁻⁴
式中:c——从标准曲线查得的糖浓度,mg/mL;10⁻⁴——将mg/mL换算为%的系数。
五、淀粉的测定:淀粉样品经乙醚、乙醇洗涤除去脂肪和可溶性糖,淀粉酸水解为还原糖,用还原糖法测定含量,再折算为淀粉含量。
淀粉含量 = 还原糖含量 × 0.9
第五节《碳水化合物的测定》到此结束,后续将讲解蛋白质与维生素的测定。
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