第1页：兽医微生物学课件封面
动物医学兽医微生物学
第2页：多媒体教学课件扉页
兽医微生物学(多媒体教学课件)
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第4页：本篇章节目录
- 第八章 抗原与抗体
- 第九章 免疫系统与免疫应答
- 第十章 抗感染免疫
- 第十一章 变态反应
- 第十二章 免疫调节与免疫遗传
- 第十三章 免疫血清学技术
- 第十四章 免疫学的应用
第5页：第十四章 免疫学的应用 章节目录
- 第十四章 免疫学的应用
- 第一节 免疫诊断与检测
- 第二节 免疫防治
- 第三节 佐剂与免疫增强剂
第6页：兽医生物制品
- 兽医生物制品：兽医生物制品指用于动物传染病预防、诊断、治疗的生物制剂。包括疫苗、诊断液、免疫血清。
- （一） 疫苗用于人工自动免疫预防动物传染病的生物制剂。包括弱毒活疫苗、灭活疫苗、类毒素和新型疫苗等。
- （二） 诊断液用于动物传染病免疫学：诊断的生物制剂。包括诊断抗原、诊断抗体、冻干补体等。
- （三） 免疫血清用于动物传染病：免疫防治的含有高效价抗体的动物血清制剂。包括抗菌血清、抗病毒血清、抗毒素、康复血清、高免蛋黄抗体等。
第7页：第一节 免疫诊断与检测
第一节 免疫诊断与检测：免疫学在兽医学的应用主要在病原微生物及其相关产物的检测与疾病防治多个方面。
- 一 免疫血清学技术的应用
- 1. 疾病诊断用免疫血清学技术通过检测相应抗原、抗体对动物传染病、寄生虫病等进行诊断。
- 2. 生物活性物质的超微定量动物激素、维生素等，在体内含量极微，但在调节机体的生理活动中起重要作用，可通过分析测定这些微量物质含量及变化，研究机体各种生理功能(如生长、生殖等)。
第8页：由于这些物质含量极低
- 由于这些物质含量极低，常规方法不能准确测出。用放射免疫测定和酶免疫技术已能精确测出ng(10-9g)或pg(10-12g)/mL水平的物质，已成为测定动植物、昆虫体中微量激素及其他活性物质，研究动物生殖、植物生理和生物防治的重要手段。
- 3. 物种鉴定各种生物之间的差异都可表现在抗原性不同，物种种源越远，抗原性差异越大，可用区分抗原性的血清学反应，进行包括微生物在内的物种鉴定、物种的分类等。
第9页：生物性状免疫标记与选择育
- 4. 生物性状免疫标记与选择育种通过分析动物、植物一些优良性状(如高产、优质、抗逆性等)的特异性抗原，用血清学方法进行标记选择育种，是很有前途的方向。
- 5. 免疫增强药物和疫苗研究疫苗研究中需用血清学反应和细胞免疫技术测定免疫效果，研究免疫增强药物，尤其研究抗肿瘤药物时还需用细胞免疫技术分析测定对机体细胞免疫功能的增强作用。
第10页：抗原抗体
- 6. 抗原抗体：在细胞和亚细胞水平的定位传染性病原从机体特定部位入侵，并在特定组织细胞内增殖，引起发病。以荧光抗体染色或免疫酶组化染色，可在细胞水平上确定病毒等病原微生物I的感染细胞，进行抗原的定位。
- 7. 分子生物学研究领域在基因工程中，基因的分离、克隆、筛选、表达产物的定性与定量分析、表达产物的纯化等均涉及到免疫技术。
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第12页：②测定细胞免疫反应
②测定细胞免疫反应能力抗原注射机体后的细胞免疫反应，分析该抗原刺激T细胞免疫的表现及其细胞免疫机制。③筛选药物免疫增强剂或免疫抑制剂药物，或研究化学药物、物理疗法对机体免疫功能的影响。④研制淋巴因子如干扰素、白细胞介素制剂过程中，测定其活性及效价水平。
第13页：第二节 免疫防治
第二节 免疫防治：机体对病原微生物的免疫力分为先天性免疫和获得性免疫两种，前者是动物体在种族进化进程中得到的天然防御能力，后者是动物体在个体发育过程中受到病原体及其产物刺激而产生的特异性免疫力。特异性免疫又分为主动免疫和被动免疫两种。用疫苗对动物进行免疫接种经主动免疫方式使动物获得免疫力，是预防和控制动物传染病的重要手段和中心工作。获得性免疫的类型：
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第15页：天然被动免疫新生动物通过
- 一 天然被动免疫新生动物通过母体胎盘、初乳或卵黄从母体获得某种特异性抗体，从而获得对某种病原体的免疫力称为天然被动免疫。天然被动免疫在免疫防治中具有重要意义。由于动物在生长发育的早期(如胎儿和幼龄动物)，免疫系统还不够健全，对病原体感染的抵抗力较弱，此时可通过获得母源抗体增强免疫力，以保证早期的健康生长发育。天然被动免疫既可保护胎儿免受病原体的感染，又可抵御幼龄动物传染病。
第16页：天然主动免疫
- 在初乳中的IgG、IgM可抵抗败血性感染，IgA可抵抗肠道病原体的感染。然而母源抗体可干扰弱毒疫苗对幼龄动物的免疫效果。
- 二 天然主动免疫：天然主动免疫是指动物在感染某种病原微生物耐过后产生的对该病原体再次侵入的不感染状态（免疫力、抵抗力）。自然环境中的致病微生物可通过呼吸道、消化道、皮肤或黏膜侵入动物机体，在体内不断增殖，与此同时刺激动物机体的免疫系统产生免疫应答。
第17页：免疫力产生快（30min)
- 三 人工被动免疫将免疫血清或自然发病动物的康复血清等抗体制剂人工输入动物体内，使其获得某种特异抵抗力，称为人工被动免疫。特点
- 1. 免疫力产生快（30min)
- 2. 免疫力维持时间短，一般1-4周。免疫血清可用同种动物或异种动物制备，用同种动物制备的血清称为同种血清，用异种动物制备的血清称为异种血清。
第18页：抗细菌血清和抗毒素通常用
抗细菌血清和抗毒素通常用大动物(马、牛等)制备，如用马制备破物风抗毒素，用牛制备猪丹毒血清均为异种血清。抗病毒血清常用同种动物制备，同种动物血清的产量有限，但免疫后不引起应答反应，因而比异种血清免疫期长。在家禽还常用卵黄抗体制剂进行人工接种，如鸡群发生IBD时，用高效价IBD卵黄抗体进行紧急接种，可起到良好的防治效果。
第19页：人工主动免疫
- 四 人工主动免疫：人工主动免疫是给动物接种疫苗等生物制品，刺激机体免疫系统发生应答反应，产生特异性免疫力。
- 1. 与人工被动免疫比较所接种的物质不是免疫血清或卵黄抗体，而是刺激免疫应答的各种疫苗、类毒素等；需要一定的诱导期。如病毒抗原需3-4d，细菌抗原需5-7d，毒素抗原需2-3周；但人工主动免疫产生的免疫力持续时间长，免疫期可达数月甚至数年，而且有回忆反应，某些疫苗免疫后，可产生终生免疫。
第20页：疫苗的种类已
- 2. 疫苗的种类已：有的疫苗概括起来分为活疫苗、灭活疫苗、代谢产物和亚单位疫苗以及生物技术疫苗，其中生物技术疫苗又分基因工程亚单位疫苗、合成肽疫苗、抗独特型疫苗，基因工程活疫苗以及DNA疫苗等。
- （1） 活疫苗简称活苗，有强毒苗、弱毒苗和异源苗三种。强毒苗是应用最早的疫苗种类，使用强毒进行免疫有较大的危险，非情况特殊不予使用。
第21页：弱毒苗
- 弱毒苗
- 是目前使用的最广泛的疫苗，弱毒苗的毒力已致弱，仍保持原有抗原性，并能在体内繁殖，用较少剂量诱导产生坚实的免疫力。有些弱毒苗可刺激产生干扰素，可抵抗其他野毒的感染。但是弱毒苗有的可能散毒，有的贮存与运输的不便，而且保存期较短，将其制成冻干苗可延长保存期。异源苗是用具有共同保护性抗原的不同种微生物制备成的疫苗。如用火鸡疱疹病毒(HVT)接种预防鸡马立克病，用鸽痘病毒预防鸡痘等。
第22页：灭活疫苗病原微生物经理化方法
- （2） 灭活疫苗病原微生物经理化方法：灭活后，仍然保持免疫原性，接种后使动物产生特异性抵抗力，这种疫苗称为灭活疫苗（死苗）。由于死苗接种后不能在动物体内繁殖，因此使用接种剂量较大，免疫期较短，需加入适当的佐剂以增强免疫效果延长免疫期。优点是研制周期短、使用安全和易于保存。目前所使用的有组织灭活苗、油佐剂灭活苗和氢氧化铝胶灭活苗等。
第23页：代谢产物和亚单位疫苗
- （3） 代谢产物和亚单位疫苗：代谢产物疫苗，如毒素、酶等都可制成疫苗，破伤风毒素、白喉毒素、肉毒毒素、致病性大肠杆菌肠毒素，经甲醛灭活后制成的类毒素有好的免疫原性，可作为主动免疫制剂。亚单位疫苗是将病毒的衣壳蛋白与核酸分开、除去核酸用提纯的蛋白质衣壳制成的疫苗。此类苗保含有病毒的抗原成分，无核酸，因而无不良反应，使用安全，效果较好。猪口蹄疫、伪狂犬病、狂犬病等亚单位疫苗已有成功的试验报道。亚单位疫苗由于制备困难，价格昂贵。
第24页：生物技术疫苗
- （4） 生物技术疫苗：生物技术疫苗是利用生物技术制备的分子水平的疫苗，包括基因工程亚单位疫苗、合成肽疫苗、抗独特型疫苗、基因工程活疫苗以及DNA疫苗。基因工程亚单位疫苗基因工程亚单位疫苗是用DNA重组技术，将编码病原微生物保护性抗原的基因导人受体菌(如大肠杆菌)或细胞，使其在受体细胞中高效表达，分泌保护性抗原肽链。提取保护性抗原肽链，加入佐剂即制成基因工程亚单位疫苗。
第25页：合成肽疫苗
合成肽疫苗合成肽疫苗是用化学合成法，人工合成病原微生物的保护性多肽，并将其连接到大分子载体上，再加入佐剂制成的疫苗。抗独特型疫苗抗独特型疫苗是免疫调节网络学说发展到新阶段的产物。抗独特型抗体，可刺激机体产生与抗原特异性抗体具有同等免疫效应的抗体。但制备不易，成本较高。基因工程活疫苗基因工程活疫苗包括基因缺失疫苗和重组活载体疫苗及非复制性疫苗三类。
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第27页：DNA疫苗
- DNA疫苗：是一种最新的分子水平的生物技术疫苗，将编码保护性抗原的基因与能在真核细胞中表达的载体DNA重组，重组的DNA可直接注射(接种)到动物(如小鼠)体内，目的基因可在动物体内表达，刺激机体产生体液免疫和细胞免疫。
- （5） 多价苗与联苗：多价苗是指将同一种细菌(或病毒)的不同血清型混合制成的疫苗。如巴氏杆菌多价苗、大肠杆菌多价苗等。联苗是指由两种以上的细菌(或病毒)联合制成的疫苗，一次免疫可达到预防几种疾病的目的。
第28页：疫苗的使用免疫途径接种
- 3. 疫苗的使用免疫途径接种：疫苗的方法有滴鼻、点眼、刺种、注射、饮水和气雾等。家禽免疫可采用滴鼻、点眼、饮水、注射及气雾等多种途径。滴鼻与点眼免疫效果较好，仅用于接种弱毒疫苗，可直接刺激眼底哈德腺和结膜下弥散淋巴组织等，产生局部免疫。饮水免疫是最方便的疫苗接种方法，但免疫效果较差，不适于初次免疫。
第29页：刺种与注射
- 刺种与注射
- 是常用的免疫方法，适于某些弱毒苗如鸡痘与马立克病免疫。另外灭活苗的免疫也必须用注射的方法进行。刺种与注射方法免疫确实，效果好。气雾免疫分为喷雾免疫和气溶胶免疫两种方式。喷雾免疫的雾粒大小为10-100um，在新城疫免疫中，气雾免疫效果较好，不仅可诱导产生循环抗体，而且也可产生局部免疫力，但气雾免疫会造成一定程度的应激反应，容易引起呼吸道感染。
第30页：免疫程序
- 4. 免疫程序：免疫程序应根据疫病在本地区的流行情况及规律、畜禽的用途(种用、肉用或蛋用)、年龄、母源抗体水平和饲养条件，以及使用疫苗的种类、性质、免疫途径等方面的因素制定，不宜作统一规定。免疫程序应随情况的变化而作适当的调整，不存在普遍适用的最佳免疫程序。动物的抗体监测是重要的参考依据。
第31页：第三节 佐剂与免疫增强剂
第三节 佐剂与免疫增强剂
- 一 佐剂一种物质先于抗原或与抗原混合同时注入动物体内，能非特异性地改变或增强机体对该抗原的特异性免疫应答，发挥辅助作用，这类物质统称为佐剂或免疫佐剂。
- （一） 佐剂的作用可增强抗原物质的抗原性外，还可通过加入佐剂减少抗原用量和接种次数，增强抗原所激发的抗体应答，达到产生大量特异性抗体的目的。
第32页：佐剂的作用方式
- （二） 佐剂的作用方式
- 1. 在接种部位形成抗原贮存库使抗原缓慢释放，延长抗原在局部组织内的滞留时间，较长时间使抗原与免疫细胞接触并激发对抗原的应答。2．增加抗原的表面积提高抗原的免疫原性，辅助抗原暴露并将能刺激特异性免疫应答的抗原表位递呈给免疫细胞。3．促进局部的炎症反应增强吞噬细胞的活性，促进免疫细胞的增殖与分化，诱导细胞因子的分泌。
第33页：不溶性铝盐类佐剂
- （三） 佐剂的类型
- 1. 不溶性铝盐类佐剂：是一类在疫苗上应用很广泛的佐剂，通常使用的主要有氢氧化铝胶、明矾、磷酸三钙等。
- 2. 油水乳剂佐剂：是用矿物油、乳化剂(如Span-80、Tween-80)及稳定剂(硬脂酸铝)，按一定比例混合作为油相，然后与抗原液混合制成各种类型的油水乳剂，例如油包水型乳剂(W/O)，水包油包水型双乳化佐剂等。
第34页：蜂胶佐剂
- 3. 蜂胶佐剂：蜂胶是蜜蜂采自植物幼芽分泌的树脂，并混入蜜蜂上颚腺分泌物，以及蜂蜡、花粉及其他一些有机与无机物的一种天然物质。它作为佐剂具有良好的免疫增强作用。
- 4. 合成佐剂这类：有胞壁酰二肽(MDP)及其衍生物等。
第35页：免疫增强剂
- 二 免疫增强剂：免疫增强剂是指一些单独使用即能引起机体出现短暂的免疫功能增强作用的物质，有的可与抗原同时使用，有的佐剂本身也是免疫增强剂。免疫增强剂的种类繁多，主要有以下几类：
- 1. 生物性免疫增强剂这类免疫增强剂有转移因子、免疫核糖核酸(iRNA)、胸腺激素、干扰素、植物及中药多糖成分。
- 2. 细菌性免疫增强剂：包括小棒状杆菌、卡介苗、细菌脂多糖等。
第36页：化学性免疫增强剂
- 3. 化学性免疫增强剂：有左旋咪唑、吡喃、梯洛龙、多聚核苷酸等。
- 4. 营养性免疫增强剂：包括维生素、微量元素等。免疫增强剂可用于治疗某些传染病如真菌感染，免疫性疾病如免疫缺陷、免疫抑制性疾病，以及非免疫性疾病如肿瘤。
第37页：结束页与致谢
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