第1页:兽医微生物学课件封面
动物医学兽医微生物学
第2页:多媒体教学课件扉页
兽医微生物学(多媒体教学课件)
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第4页:本篇章节目录
- 第二十九章 病毒的结构
- 第三十章 病毒的复制
- 第三十一章 病毒的遗传与进化
- 第三十二章 病毒的与细胞的相互作用
- 第三十三章 病毒的致病机理
- 第三十四章 双股DNA病毒
- 第三十五章 单股DNA病毒
- 第三十六章 具有反转录过程的病毒
- 第三十七章 双股RNA病毒
- 第三十八章 单负股病毒目
- 第三十九章 分节段的负股RNA病毒
- 第四十章 套式病毒目
- 第四十一章 其他正股RNA病毒
- 第四十二章 朊病毒
第5页:第三十一章 病毒的遗传与进化 章节目录
- 第三十一章 病毒的遗传与进化
- 第三十二章 病毒与细胞的相互作用
- 第一节 病毒的培养
- 第二节 病毒与细胞的相互作用
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第7页:用途用于病毒学研究
- 2. 用途用于病毒学研究:分离病毒,病毒克隆纯化,病毒病诊断及疫苗制备等。
- 3. 特点一致性好,材料易得,易标准化试验,可重复性好。可通过细胞病变判定病毒感染,也可结合免疫学技术检测细胞内的病毒。
- 二 细胞培养类型
- 1. 原代细胞动物组织经胰蛋白酶等消化、分散,获得单个细胞悬液,再生长于培养器皿中。制备原代细胞,肾和睾丸最为常用,以来源于SPF胚胎或幼畜组织的细胞为好。
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第10页:悬浮培养通过搅拌使细胞处于
- 3. 悬浮培养通过搅拌使细胞处于:悬浮状态,井补充营养和校正pH,使之生长或维持存活。适用某些不需贴壁生长的细胞系,如NS1(一种骨髓瘤细胞系)。
- 4. 微载体培养:是在悬浮培养的基础上,结合微载体的细胞培养技术。微载体是直径35-100um微小颗粒,对细胞无毒性,细胞可贴附其上长成单层。由于微载体数量较大,所获得的细胞数也比上述常规方法大为增加,用于规模化细胞或疫苗生产。微载体有若干型号、已商品化。
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第13页:空斑形成将10倍梯度稀释
- 三 空斑形成将10倍梯度稀释的病毒样本接种吸附于单层细胞,而后在细胞上覆盖一层含营养液的琼脂,以防止游离的病毒通过营养液扩散,但病毒可在细胞间传递。经过一段时间培养,进行染色,原先感染病毒的细胞及病毒扩散的周围细胞会形成一个近似圆形的斑点,类似固体培养基上的菌落形态,称为空斑或蚀斑(细胞病变)。
第14页:一个空斑
一个空斑可能由一个以上病毒颗粒感染所致,因此可将获得的单个空斑制作悬液,梯度稀释后再作空斑,最终可获得只含一个病毒颗粒及其子代的空斑,这就是病毒克隆。借助空斑技术不仅可纯化病毒,还对病毒定量,定量单位称为空斑形成单位(PFU)。通过PFU的计数及PFU减数试验,可滴定血清的效价、测定干扰素的活性等。许多动物病毒如疱疹病毒、披膜病、微RNA病毒及水泡性口炎病毒均可通过此法作定量分析。
第15页:包涵体
- 四 包涵体:包涵体是某些病毒感染细胞产生的特征性的形态变化,可通过固定染色而后在光学显微镜下检测。包涵体位置(核内、胞浆),数量(单个、多个),大小(较大、较小),形态(圆形、无规律形态),染色性[嗜酸伊(红染成粉红色)或嗜碱(苏木精染成蓝色)],因病毒的种类而异,可用于诊断。
第16页:病毒引致的非杀细胞变化非
- 五 病毒引致的非杀细胞变化非杀细胞病毒的感染通常引致持续感染,对细胞的新陈代谢并无大碍,但同时还生产并释放子代病毒颗粒。除少数例外,大多持续感染的细胞发生慢性渐进性变化,最终死亡。
- 六 干扰素病毒感染的细胞能抵抗相同或不同病毒的再次感染,称之为病毒的干扰。干扰的机制:一种是由缺陷型突变株所致,通常干扰同源病毒,另一是由干扰素介导。
第17页:干扰素的性质目前已发现人
- 1. 干扰素的性质目前已发现人类有约24种干扰素,动物的干扰素发现稍少。干扰素属于细胞因子的成员,可分为α、β、γ三个型,其中人的α型至少有22个亚型之多。其特性参见表32-2-452。干扰素不是细胞持续合成,而是细胞对强烈刺激如病毒感染的应答时一过性的分泌物。干扰素具有宿主特异性,例如鼠干扰素对人无效,反之亦然。
第18页:干扰素并无病毒特异性
- 干扰素并无病毒特异性,例如副粘病毒感染诱导的干扰素对披膜病毒感染完全有效。干扰素在分泌部位或经循环至全身。通常在病毒感染早期即在第一批子代病毒释放之时产生于从而对相邻细胞及机体产生保护作用。干扰素的效果证实:第
- 一 在病毒的感染中,干扰素的产生与康复正相关;第
- 二 如果抑制干扰素的产生,则使感染更为严重;第
- 三 应用于扰素
第19页:干扰素的抗病毒活性病毒感
- 2. 干扰素的抗病毒活性病毒感染细胞诱导产生释放干扰素,干扰素与其他细胞的胞浆膜的特异受体结合;干扰素与受体结合后,通过信号导致许多细胞蛋白的合成(包括抗病毒蛋白),直接或间接抑制病毒蛋白质合成及复制。
第20页:结束页与致谢
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