39 第三十八章 朊病毒.ppt

第1页：兽医微生物学课件封面

动物医学兽医微生物学

第2页：多媒体教学课件扉页

兽医微生物学(多媒体教学课件)

第3页：

第4页：本篇章节目录

• 第二十九章 病毒的结构
• 第三十章 病毒的复制
• 第三十一章 病毒的遗传与进化
• 第三十二章 病毒的与细胞的相互作用
• 第三十三章 病毒的致病机理
• 第三十四章 双股DNA病毒
• 第三十五章 单股DNA病毒
• 第三十六章 具有反转录过程的病毒
• 第三十七章 双股RNA病毒
• 第三十八章 单负股病毒目
• 第三十九章 分节段的负股RNA病毒
• 第四十章 套式病毒目
• 第四十一章 其他正股RNA病毒
• 第四十二章 朊病毒

第5页：本篇章节目录

• 第四十章 套式病毒目
• 第四十一章 其他正股RNA病毒
• 第四十二章 朊病毒

第6页：第四十章 套式病毒目

第四十章 套式病毒目

第一节

• 一 猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)已报道4种冠状病毒能感染猪：猪血凝性脑脊髓炎病毒、猪流行性腹泻病毒、猪传染性胃肠炎病毒及猪呼吸道冠状病毒(PRCV)。

第7页：致病TGEV

• 1. 致病TGEV：在世界各地均有发现，引致仔猪腹泻，伴有呕吐，3周龄以下的仔者有较高死亡率。但有时成年猪也有高死亡率，母猪表现为厌食、发热、腹泻及无乳等。
• 2. 致病机理病毒通过消化道进入机体，潜伏期18-72h。仔猪易感染出现临床症状，原因是仔猪的胃分泌物酸度低。病毒损伤肠绒毛后，绒毛上皮细胞分泌的乳糖酶及其他双糖酶减少，导致肠道内容物的渗透压增高，水从组织进入肠腔，导致腹泻。

第8页：病变仅限于胃肠道

• 3. 病变仅限于胃肠道，：包括胃肿胀及小肠肿胀，绒毛破坏，肠壁变薄。
• 4. 防制仔猪可通过初乳及奶液获得母源IgA抗体，产生被动免疫。但血清中的IgG抗体不能提供保护。非经肠免疫不能产生母源免疫，唯有通过黏膜免疫才有效。

第9页：疫区病毒

疫区病毒可能在某些猪持续存在。对易感猪群的所有猪检疫、免疫接种。疫苗FIPV温度敏感突变株疫苗已商品化。疫苗通过鼻黏膜接种，此处无抗体形成，有利病毒低水平的复制，从而产生免疫应答获得保护。大多数成年猪已感染病毒，抗体阳性，接种疫苗无效。

第10页：印象1973年

• 二 禽传染性支气管炎病毒(AIBV)
• 1. 印象1973年：在美国最先确定病原，目前已在几乎世界各国发现，并且是鸡的最重要的病毒之一。本病毒是冠状病毒科的原型，由于基因组大而易发生突变，产生许多抗原性及致病性的变异株。用中和试验可分为8-10个血清型。
• 2. 感染病毒：主要感染鸡，此外还对雉、鸽、珍珠鸡有致病性。发病取决于鸡的日龄、免疫状况以及毒株。

第11页：急性暴发1-4周龄雏鸡最

急性暴发1-4周龄雏鸡最易感，表现为气喘、咳嗽及呼吸困难，并可突然死亡。青年鸡的感染率可达75％。生长迟缓弱毒株感染几乎无临床症状，但导致生长迟缓成为侏儒。产蛋鸡产蛋量下降或者停，或产异常蛋。新病型近年来还出现以肾、肠或腺胃病变为主的致病型。目前已在全世界发现。

第12页：致病机理传播病毒通过气雾

• 3. 致病机理传播病毒通过气雾、污染粪便的食物而在鸡群中迅速传播。在环境中病毒可存活数天，在低温环境下，则可存活数周。鸡群中往往存在持续感染的带毒者。复制病毒先在呼吸道纤毛上皮细胞或肠道复制，可达到很高滴度。后出现病毒血症，将病毒散布到许多器官，最终导致生殖系统及肾脏的严重损伤，可产生永久性的结构损伤。

第13页：

第14页：预防与控制建立无病鸡群

• 6. 预防与控制建立无病鸡群：是根本措施。弱毒苗（H120、H52株）被广泛地应用。免疫途径包括饮水、喷雾或点眼。通常在7-10日龄时接种疫苗，4周龄时再欠免疫。小于7日龄的雏鸡免疫多数不成功，因为此时有母源抗体的于扰。由于AIBV不断出乳新的突变株，各型病毒免疫交叉弱，免疫效果是个问题。

第15页：第四十一章 其他正股RNA病毒

第四十一章 其他正股RNA病毒

第一节

• 一 口蹄疫病毒(FMDV)
• 1. 印象口蹄疫：是全球性最重要的动物疫病，常在牛群、猪群大范围流行。多种偶蹄动物都易感。感染率很高，致死率较低。人类偶能感染，表现发热、食欲差及口、手、脚产生水泡。

第16页：血清型口蹄疫病毒

• 2. 血清型口蹄疫病毒：有7个血清型，分别命名为O、A、C、SATl、SAT2、SAT3及亚洲1型，每个型又可划分亚型。由于不断发生抗原漂移，因此并不能严格区分亚型。
• 3. 致病机理症状病畜口、鼻、蹄等部位出现水泡为主要症状，且可能跛行。怀孕母牛可能流产，而后导致繁殖力降低。猪则以跛蹄为最主要的症状。羊症状通常比牛温和。

第17页：感染反刍类动物

感染反刍类动物感染的主要途径是呼吸道，也可通过采食或接触污染物感染。经呼吸道感染时，最初在咽复制，而后传播到其他组织。病毒排出患畜通过分泌物、奶、飞沫大量排出病毒。某些康复动物的咽部长时间存在。牛在感染后可长达两年，绵羊可达6个月。传播病毒可长距离经气雾传播，吹风（低温、高湿、阴暗）有利于其传播。免疫康复牛对同型病毒感染的免疫力可维持1年或稍长。

第18页：诊断申报被列

• 4. 诊断申报被列：为必须申报的疾病，诊断只能在指定的实验室进行。送检样品包括水泡液、剥落水泡痂、抗凝血或血清等。死亡动物则可采淋巴结、扁桃体。样品应冰冻保存，或置于pH7.6的甘油缓冲液中。检测方法OIE推荐使用商品化及标准化的ELISA试剂盒用于诊断，数小时出结果。也用细胞培养分离病毒，分离的病毒通过LLISA或者中和试验加以鉴定。

第19页：预防与控制

• 5. 预防与控制：由于病毒高度的传染力，控制措施必须非常周全和严格。无病地区严禁从疫区调运牲畜。消灭一旦发病，应立即封锁现场，焚毁或深埋病畜。疫区周边的畜群应接种疫苗，建立免疫防护带。疫苗弱毒疫苗可能散毒，不安全。推荐使用浓缩的灭活疫苗。

第20页：猪水泡病病毒(SVDV)

• 二 猪水泡病病毒(SVDV)
• 1. 致病引致猪水泡病，家畜中仅猪感染发病，人偶可感染。症状与口蹄疫相似，发热，蹄冠部、嘴、唇、舌出现水泡。偶有脑脊髓炎。
• 2. 致病机理病毒通过皮肤的伤口感染，也可经消化道感染。病猪从粪中大量排毒，病毒对低pH及温度变化有抵抗力，带毒猪肉及其制品也是传染源。

第21页：诊断与口蹄疫等要注意鉴别

• 3. 诊断与口蹄疫等要注意鉴别：诊断。ELISA用于检测水泡液或水泡皮中的病毒抗原，4-24h可获结果。
• 4. 预防与控制发现病历必须申报，控制措施可参照对付口蹄疫病毒的办法。

第22页：致病只对1-21日龄鸡

• 三 禽脑脊髓炎病毒
• 1. 致病只对1-21日龄鸡：致病。易感鸡群死亡率可高达50％。病毒只有1个血清型，但毒株毒力有较大差异。目前全世界匀有报道。
• 2. 致病机理传播传染经粪-口途径，病鸡的卵也可传播病毒。症状潜伏期1-7d，病鸡呆滞、头颈震颤、失明、麻痹。组织学检查见典型的病毒性脑炎的病变。

第23页：诊断组织冷冻切片作荧光抗

• 3. 诊断组织冷冻切片作荧光抗体染色。分离病毒可接种无卵黄抗体的5-7日玲鸡胚卵黄囊，也可接种鸡胚细胞。
• 4. 预防与控制弱毒疫苗可用于10周龄雏鸡饮水免疫，小于10周龄雏鸡使用不安全。灭活疫苗适用于未免疫鸡群。

第24页：第二节 嵌杯病毒科病毒颗粒球形

第二节

• 一 兔出血症病毒(RHDV)引致家兔及野兔出血性败血症，肺及肝病变严重。1984年杜念兴、徐为燕教授等在我国最先报道。

第25页：致病机理病毒经粪—口途径

• 1. 致病机理病毒经粪—口途径传播，2月龄以上兔易感。最急性者常在6-24h内死亡。急性或亚急性病例可见流鼻液，并可表现各种神经症状，发病率100％，死亡率90％。剖检可见凝血块充满全身组织的血管，血管内凝血引发肝坏死。病毒能凝集人红细胞。

第26页：诊断从感染组织

• 澳大利亚和新西兰引进RHDV用以控制当地过多的野生家兔，出乎意外地发现，蚊、蝇及乌鸦、鹰等肉食性鸟，可作为病毒的传播媒介。
• 2. 诊断从感染组织：主要是肝可获得高滴度的病毒，用人红细胞作血凝试验，再以抗体作血凝抑制试验即可确诊。也可用ELISA等作诊断。
• 3. 预防与控制除采取严格的隔离消毒措施外，可取肝等匀浆制成灭活疫苗，对兔群免疫接种。

第27页：第五节 黄病毒科病毒颗粒呈球形

第五节

• 一 日本脑炎病毒
• 1. 致病又名乙型脑炎病毒，为人畜共患病毒。多种动物包括猪、马、犬、鸡、鸭等均可自然感染。母猪通常无症状，但孕猪可流产或死产。病毒常见于中国、韩国及东南亚国家。三喙库蚊是最常见的传播媒介。通过蚊—猪—蚊传播循环病毒。

第28页：防制弱毒细胞疫苗

• 2. 防制弱毒细胞疫苗：或灭活疫苗接种人及猪可有效地预防和控制本病毒。
• 二 牛病毒性腹泻病毒(BVDV)
• 1. 致病病毒引致的急性疾病：称为牛病毒性腹泻，引致的慢性持续性感染称为黏膜病。造成全世界奶牛、肉牛的重大经济损失。各种年龄的牛都易感，但是8-24月龄最常见。

第29页：症状腹泻体温升高及白细胞减少

• 2. 症状腹泻体温升高及白细胞减少：感染牛群发生腹泻等，奶牛群产奶量下降。由于病毒感染造成的免疫抑制，犊牛易发生呼吸道及肠道的继发感染。黏膜病黏膜病可突然发病，也可延续数周或数月反复发生，表现为发热、厌食、腹泻、流鼻涕、糜烂性或溃疡性胃炎、脱水等，数周或数月内死亡。死亡率可达50％。

第30页：致病机理感染病毒

• 3. 致病机理感染病毒可通过胎盘感染胎儿。可使孕期胎牛死亡或产瘦小犊牛。幸存犊牛为终身感染，由于免疫耐受。排毒从各种分泌物排毒，成为危险的传染源病变急性病毒性腹泻的患牛特征性表现为，从口部直至肠道整个消化道出现糜烂性或溃疡性病灶。肠系膜淋巴集结出血坏死。临床表现与牛瘟有相似之处。

第31页：诊断根据临床症状初诊

• 4. 诊断根据临床症状初诊：取鼻分泌物、全血或流产的胎儿等分离病毒检测病毒。
• 5. 预防与控制净化牛群除持续感染的牛外，绵羊、山羊、猪以及鹿等野生反刍兽性，可成为病毒传染源。主要控制措施是检出并淘汰持续感染的牛，逐步净化牛群。免疫接种用灭活疫苗效果较佳，弱毒疫苗已普遍使用，但有时可诱发严重的黏膜病。

第32页：猪瘟病毒(CSFV)

• 三 猪瘟病毒(CSFV)：是世界范围内最重要的猪病病毒。亚洲、非洲、中南定洲仍然不断发生猪瘟。美、加、澳及欧洲若干国家已消灭本病。
• 1. 症状典型的猪瘟：为急性感染，伴有高热、厌食、萎顿及结膜炎。潜伏期2-4d病猪白佃胞严重减少。仔猪可无症状而死亡，成年猪往往因细菌继发感染在1周内死亡。死亡率可高达100％。

第33页：亚急性型及慢性型的潜伏期

• 亚急性型及慢性型的潜伏期及病程均延长，其病毒毒力减弱。此种毒株感染怀孕母者导致死胎、流产、木乃伊胎或死产，所产仔猪不死者产生免疫耐性，表现为颤抖、矮小并终身非毒，多在数月内死亡。
• 2. 致病机理感染病毒的最主要的入侵途径是通过采食，扁桃体是最先定居的器官，而后在内皮细胞、淋巴器官及骨髓增殖，导致出血症及白血细胞与血小板减少。

第34页：病变脾梗塞

• 病变脾梗塞：是特征性病变，常可见脑炎。肠黏膜的坏死性溃疡可见于亚急性或慢性病例。传播病猪或无症状的持续感染猪是传染源。此外各种用具如车辆，猪场人员的鞋等也可间接接触传染。
• 3. 诊断病料：在国家认可的实验室进行诊断。病料可取胰、淋巴结、扁桃体、脾及血液。方法用荧光抗体法、免疫组化法、ELISA法可快速检出病毒抗原。

第35页：预防与控制卫生餐厅与食堂

• 4. 预防与控制卫生餐厅与食堂或屠宰场的废弃泔水等应蒸煮处理后喂猪，以杀死可能存生的猪瘟病毒。冻肉及猪肉制品中的病毒可存活数年，运输检疫应予注意。免疫我国的猪瘟兔化弱毒疫苗是国际公认的有效疫苗，得到广泛使用。消灭一些发达国家消灭猪瘟采取的措施是“检测加屠宰”，即检出阳性的猪全群扑杀，费用高昂，但十分成功。

第36页：第四十二章 朊病毒

第四十二章 朊病毒：朊病毒(prion)是动物与人传染性海绵状脑病(TSE)的病原，实质上不是传统意义上的病毒。它没有核酸，只有传染性的蛋白质颗粒。早在15世纪发现的绵羊的痒病就是由朊病毒所致，1986年在英国发现的“疯牛病”(牛海绵状脑病)，严重打击了养牛业，并危及人类健康，震惊全世界，至今余波未平。

第37页：“疯牛病”

“疯牛病”(牛海绵状脑病)病原也是朊病毒。美国科学家Prusiner获1997年诺贝尔医学奖，就是为了表彰其在研究朊病毒的性质及其所致的TSE的致病机理所取得的突破性进展。

第38页：第一节 朊病毒

第一节 朊病毒：的特性

• 1. 性质朊病毒：是细胞正常蛋白经变构后而获得致病性。这种正常的细胞蛋白名为PrPc。大多数哺乳动物的基因组均编码，并在许多组织尤其是神经元及淋巴内皮细胞中表达。PrPc与PrPscPrP是朊病毒蛋白(prionprotein)的缩写。PrPc是正常细胞的一种糖蛋白，分子量27000-30000，称为PrP27-30。PrP27-30是PrP33-35蛋白酶K不完全消化的产物。

第39页：PrPc的同源异构体

PrPc的同源异构体

称为PrPsc，二者的氨基酸序列相同，但是PrPsc的构象改变了。已筛选到区分二者的单克隆抗体。PrPsc抵抗内切酶的消化，后者导致其凝聚，形成直径约4-6nm的螺旋形杆状纤维，即所谓痒病相关纤维(SAF)(图42—1)。SAF在脑组织内形成神经元空斑，亦即PrP斑。引致海绵状损害及丧失神经元功能。

第40页：生物学特性朊病毒

• 2. 抗性许多足以杀灭病毒及其他微生物的化学药物或环境及物理因素对PrPsc无效(表42-1-575)。
• 3. 生物学特性朊病毒：在仓鼠、小鼠脑内增殖时间为5.2d，在人和动物的潜伏期长达软月至数十年。感染引致脑组织空泡变性、淀粉样蛋白斑块、神经胶质细胞增生等，不引起炎性反应。无包涵体，不诱导干扰素，不破坏宿主B细胞和T细胞的免疫功能，不引起宿主的免疫反应。

第41页：朊病毒

• 将绵羊、牛或人的朊病毒在小鼠或仓鼠接种传代，其受体动物PrPsc氨基酸序列与受本动物的PrPc相同，而不是与供体动物的相同。

第二节 朊病毒：的分类与一般的病毒分类不同，朊病毒目前按照其宿主、分子及生物学特性分类(表42-2-577)。动物源及人源朊病毒经接种均可传染其他动物，如仓鼠、大鼠、雪貂、貂、绵羊、山羊、猪、牛、猴及黑猩猩。

第42页：第三节 朊病毒

第三节 朊病毒：的复制

• 1. 复制机理PrPsc经水平传递，也许还经垂直传递。PrPsc作为模板，像结晶的种晶一样，使正常编码的PrPc分子折迭聚合，形成PrPc-PrPc二聚体，进而变为PrPsc分子，这一过程需要名为X蛋白的另一种分子参与。新产生的PrPsc可催化愈来愈多的PrPc分子变为PrPsc，在神经元等靶细胞内的大量PrPsc聚合，形成SAF，变为可见的空斑。

第43页：基因调控用

• 2. 基因调控用：基因敲除技术培育的转基因小鼠缺乏PrPc基因，在接种痒病朊病毒蛋白不发病。将正常脑组织块移植到此种转基因小鼠的脑内，接种后仅移植的正常部位发生病变。将小鼠的PrPc基因敲除，以人PrPc基因取而代之，接种牛海绵状脑病朊病毒时，小鼠在500d左右发生神经性疾病，并产生病变，这一发现揭示了人的新型克雅氏病与牛海绵状脑病的关系。

第44页：第四节 牛海绵状脑病(BSE)

第四节 牛海绵状脑病(BSE)：牛海绵状脑病1986年在英国发现，俗称“疯牛病”，往往突然发作，表现为颤抖、感觉过敏、体位异常、后肢共济失调、有攻击行为甚至狂暴，产奶减少，体重下降。病程2-3周，长者可达1年，最终死亡。感染牛多为3-5岁，22月龄即有发病记载。

第45页：致病机理病变病变仅见于脑

• 1. 致病机理病变病变仅见于脑、脑灰质出现神经元空泡化、神经元变性并丧失，星状胶质细胞，肥大及增生。无炎症反应，无免疫应答。感染牛海绵状脑病朊病毒无宿主特异性，也可使其他反刍兽及猫发病。通过口服或脑内接种，可将其在绵羊、山羊、貂、绒猴、鼠猴、食蟹猴、小鼠及仓鼠传代。在牛可垂直传递。现在认为，人类的新型克雅氏病与食用污染朊病毒的牛肉有关，因此受到高度重视。

第46页：诊断症状与病理

• 2. 诊断症状与病理：根据临床症状、遗传背景及可疑病牛的脑组织的组织病理学检查可作出诊断。免疫诊断常规检查应取最易感染的部位如中脑、脑干及颈部脊髓作切片，然后用抗PrP抗体作组化染色，用脑组织提取液或脑脊液与抗体作免疫转印。ELISA方法检测正在研究。

第47页：预防与控制禁用肉骨粉饲料

• 3. 预防与控制禁用肉骨粉饲料喂牛污染朊病毒的肉骨粉作饲料喂牛是导致BSE的病因。自2000年起，欧盟国家已全面禁止使用。检疫淘汰焚毁病牛并对30月龄以上的牛全面检查，发现病牛的牛群全部淘汰、焚毁。污染物品可用高压蒸气136℃处理2h，或用5.25％次氯酸钠钠浸泡。

第48页：已有80多例猫以及若干

已有80多例猫以及若干其他动物园动物由于食用类似的肉骨饲料患海绵状脑岗，因此美国等国规定对从英国引进的上述动物进行监测。国际兽疫局制定的《国际动物卫生法典》规定，对所有临床症状与BSE相符的牛作强制性的申报与检查，并要求严格管理肉骨粉、动物胚胎等的进出口。控制此病除坚决淘汰病牛以外，目前并无其他良策。

第49页：第五节 痒病1935年英国人用绵

第五节

• 1. 致病机理发病某些品系的绵羊易感，与患痒病的绵羊接触或在污染草场放牧的山羊也会感染发病。

第50页：症状绵羊的潜伏期长达2-5年

症状绵羊的潜伏期长达2-5年。病羊表现神经症状，初期兴奋性增高，进而头、颈震颤，体躯发痒。不断擦痒，最终死亡。病程长达1-6个月。感染途径自然感染的途径未得证实，认为是经口、体表伤口感染。皮下、腹腔或静脉接种可发病，脑内接种不仅发病，而且潜伏期大为缩短。实验表明，肠、扁桃体、脾、淋巴结首先出现朊病毒，继而从肠淋巴组织侵入中枢系统，出现海绵样脑病。无炎症反应，无免疫应答。

第51页：预防与控制冰岛采取的措施

• 2. 诊断根据症状、羊群的病史再结合脑的组织学检查可作初步诊断。确诊需用PrP抗体对脑组织作免疫组化，或用脑组织抽提液或脑脊液作免疫转印。
• 3. 预防与控制冰岛采取的措施：是，彻底销毁患病羊群，牧场空置数年。而后引进无痒病的绵羊，重建健康羊群。

第52页：美国曾

美国曾在1947年及1952年两度推行消灭痒病计划，但因该病的潜伏期过长及羊群的流动性太大，难以执行。目前改行“确认健康羊群”计划，即经鉴定的健康羊群允许流动，否则不行，以此措施控制痒病的流行。

第53页：结束页与致谢

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