页数：22页文件大小：2.43 MB来源： 分析化学ppt课件
本课件讲解第七章 色谱分析法 第七节 高效液相色谱法，围绕高效液相色谱法的特点、流程及主要部件、影响分离的因素、高效液相色谱法的主要分离类型展开，配合图示、公式与例题说明相关概念、原理与计算要点，便于课前预习与课后复习。
第七章色谱分析法一、高效液相色谱法的特点二、流程及主要部件三、影响分离的因素四、高效液相色谱法的主要分离类型第七节高效液相色谱法
液相色谱仪（1）
液相色谱仪（2）
液相色谱仪（3）
液相色谱仪（4）
一、高效液相色谱法的特点特点：高压、高效、高速高沸点、热不稳定有机及生化试样的高效分离分析方法。
二、流程及主要部件1.流程
2.主要部件(1)高压输液泵•主要部件之一，压力：150～350×105Pa。•为了获得高柱效而使用粒度很小的固定相（<10μm），液体的流动相高速通过时，将产生很高的压力，因此高压、高速是高效液相色谱的特点之一。•应具有压力平稳、脉冲小、流量稳定可调、耐腐蚀等特性
(2)梯度淋洗装置外梯度:利用两台高压输液泵，将两种不同极性的溶剂按一定的比例送入梯度混合室，混合后进入色谱柱。内梯度:一台高压泵,通过比例调节阀,将两种或多种不同极性的溶剂按一定的比例抽入高压泵中混合。
(3)进样装置流路中为高压力工作状态，通常使用耐高压的六通阀进样装置，其结构如图所示：
(4)高效分离柱柱体为直型不锈钢管，内径1～6mm，柱长5～40cm。发展趋势是减小填料粒度和柱径以提高柱效。
(5)高效液相色谱检测器紫外光度检测器（UV）：最小检测量10-9g·mL-1，对流量和温度的波动不敏感，可用于梯度洗脱。最常用的检测器。
光电二极管阵列检测器光电二极管阵列检测器：1024个二极管阵列，各检测特定波长，计算机快速处理，三维立体谱图，如图所示。
三、影响分离的因素在高效液相色谱中,速率方程中的分子扩散项B/U较小，可以忽略不计，而只有两项，即：H=A+Cu故液相色谱H-u曲线与气相色谱的形状不同，如图所示：影响分离的主要因素有流动相的流量、性质和极性。
2.固定相及分离柱气相色谱中的固定液原则上都可以用于液相色谱，其选用原则与气相色谱一样。选择合适的固定相，降低填料粒度可显著提高柱效，但在高效液相色谱中，分离柱的制备是一项技术要求非常高的工作，一般很少自行制备。选择短柱、细内径提高分析速度；研制高效柱填料是一活跃领域。
流动相组成流动相按组成不同可分为单组分和多组分；按极性可分为极性、弱极性、非极性；按使用方式有固定组成淋洗和梯度淋洗。常用溶剂:己烷、四氯化碳、甲苯、乙酸乙酯、乙醇、乙腈、水。采用二元或多元组合溶剂作为流动相可以灵活调节流动相的极性或增加选择性，以改进分离或调整出峰时间。
请选择内容：第一节色谱法概述第二节气相色谱仪第三节色谱理论基础第四节气相色谱操作条件选择第五节色谱定性、定量方法第六节毛细管色谱第七节液相色谱法第八节离子色谱法第九节高效毛细管电泳第十节薄层色谱与纸色谱法结束
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