页数：8页文件大小：318.0 KB来源： 植物生理学ppt课件
本实验课件说明硝酸还原酶催化硝酸根还原为亚硝酸根的过程，介绍亚硝酸根与对氨基苯磺酸重氮化、再与α-萘胺偶联生成红色化合物的比色原理，给出标准曲线绘制、材料取样暗处保温及酶活性的计算式。
硝酸还原酶(NR)活性的测定
一、实验目的了解硝酸还原酶在氮代谢中的地位，掌握硝酸还原酶活性测定的方法。
二、实验原理植物吸收的硝酸根离子，首先通过硝酸还原酶的催化，被还原成亚硝酸根离子。其反应如下：NO3-+NADH+H+→NO2-+NAD++H2O产生的亚硝酸根离子可以从组织内渗到外界溶液中，测定反应液中亚硝酸含量，通过一定公式计算就可得硝酸还原酶活性的大小。
亚硝酸离子的测定用比色法。其反应如下：对氨基苯磺酸(或磺胺)+2H++NO2-→叠氮化合物叠氮化合物+α-萘胺（或盐酸萘乙二胺）→偶氮化合物(红色) 生成的红色偶氮化合物在520nm波长比色，其光密度值与NO2-含量成正比。
二、实验材料待测植物组织
三、方法步骤1．绘制标准曲线：试剂（ml）1234567NaNO2标准液(5微克／ml) 00.10.20.40.60.81蒸馏水10.90.80.60.40.20对氨基苯磺酸(或磺胺) 2222222盐酸萘乙二胺(或α-萘胺) 2222222每管含NaNO2的微克数00.512345试管号
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