页数：7页文件大小：114.0 KB来源： 现代生物学实验ppt课件
本课件为《现代生物学实验》的实验四-4 pH对淀粉酶活性的影响部分，重点展开实验四-4pH对淀粉酶活性的影响等内容，并说明目的要求、原理、试剂器材、操作步骤与注意事项，便于课前预习和实验现场对照操作。
实验四-4 pH对淀粉酶活性的影响
一、实验目的了解pH对酶活性的影响及最适pH的定义。二、原理酶的催化活性与环境pH有密切关系，通常各种酶只在一定pH范围内才具有活性，酶活性最高时的pH，称为酶的最适pH，高于或低于此pH时酶的活性都逐渐降低。不同酶的最适pH不同。酶的最适pH不是一个特征性的物理常数，对于一个酶，其最适pH因缓冲液和底物的性质不同而有差异。
三、试剂和器材1.试剂0.3％氯化钠的0.5％淀粉溶液、新鲜唾液、0.2 mol/L磷酸氢二钠溶液、柠檬酸钠溶液、碘化钾－碘溶液2.器材恒温水浴锅
四、操作步骤1.取3个锥形瓶，按下表的比例吸取磷酸氢二钠溶液和柠檬酸钠溶液，制备pH为5.0、6.8、8.0的三种缓冲溶液。
缓冲液配制表：下表依据源文件文字按原课件列序还原，供对照操作与记录结果使用。
| 锥形瓶号 | 缓冲液pH | 0.1mol/L柠檬酸（mL） | 0.2mol/L磷酸氢二钠（mL） |
|---|---|---|---|
| 1号 | 5.0 | 4.85 | 5.15 |
| 2号 | 6.8 | 2.28 | 7.72 |
| 3号 | 8.0 | 0.28 | 9.72 |
说明：源文件此表为压平文本（无分隔符），上表按原课件列序推断还原，建议对照原课件图片核对后使用。
pH影响加样表：下表依据源文件文字按原课件列序还原，供对照操作与记录结果使用。
| 试剂处理 | 1号管 | 2号管 | 3号管 |
|---|---|---|---|
| pH5.0缓冲溶液（mL） | 3 | — | — |
| pH6.8缓冲溶液（mL） | — | 3 | — |
| pH8.0缓冲溶液（mL） | — | — | 3 |
| 0.5%淀粉溶液（mL） | 2 | 2 | 2 |
| 唾液稀释液（mL） | 2 | 2 | 2 |
| 碘化钾－碘溶液（滴） | 2 | 2 | 2 |
说明：源文件此表为压平文本（无分隔符），上表按原课件列序推断还原，建议对照原课件图片核对后使用。
五、注意事项1.本实验中的保温时间是2min，但实际是随不同的唾液淀粉酶的活性而变化的，所以在实验前先找出准确的保温时间是本实验的关键；2.加入酶液后务必充分摇匀，保证酶与全部淀粉溶液接触，反应才能得到理想的颜色梯度变化结果。
六、思考题1. pH值导致酶活性丧失的分子机理是什么？2. pH值改变导致的活性丧失，pH值恢复后活性也能恢复吗？
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