35 实验十二、石蜡切片法（一）取材、固定、洗涤、脱水.ppt

第1页：实验十二石蜡切片法（一）取材、固定、洗涤

• 实验十二石蜡切片法（一）取材、固定、洗涤、脱水一、实验原理
• 取材：用于制片的动植物材料应选择新鲜的，用陈腐材料制片，往往不能反映材料的真正情况。
• 固定：固定是借助化学药品的作用,使细胞组织的形态保存下来,不使其改变形态和变质。

第2页：洗涤:是洗去渗入细胞内部的固定液

• 洗涤:是洗去渗入细胞内部的固定液。因材料中的固定液有的会妨碍染色；有的会发生沉淀或结晶，影响观察；有的会继续作用，使材料变坏等。
• 脱水：材料经洗涤后含有大量的水分，必须用脱水剂脱尽里面的水分，以利于材料的透明和制片的保存。因为水分会使材料分解，而且透明剂与水是不相混合的，只有在完全无水的情况下，透明剂才能完全透入。

第3页：二、试剂与器材

二、试剂与器材1.试剂：10%中性福尔马林固定液、各级乙醇（50%、70%、85%、95%、100%）2.器材：解剖刀、解剖针、剪刀、镊子、解剖盘、单面刀片、培养皿、吸管、指形管、橡皮圈、软木塞、胶布、塑料脸盆。

第4页：三、实验程序1．取材

三、实验程序1．取材：用锋利的刀片切取材料。2．固定：将已切好的材料放入10%的福尔马林溶液中固定12-24小时。固定剂一般为组织块体积的10-15倍。3．洗涤：材料自固定液中取出，放入指形管，加入半管水，用纱布将管口扎紧，置于水槽内，进行流水冲洗。流水冲洗时间一般需要12-24小时。4．脱水：材料自低浓度至高浓度的酒精进行脱水。一般经50%、70%、85%、95%直至纯酒精。每级停留约30分钟至1小时。如需过夜，应停留在70%酒精中。

第5页：四、注意事项

• 四、注意事项取材的注意事项：
• 材料应新鲜；
• 动作要迅速；
• 取病理材料时，应加对照。固定的注意事项
• 固定液以新配为好；
• 固定的时间依材料的种类、性质、大小等而定；
• 材料固定完毕，保存于加盖的容器，贴上标签。

第6页：洗涤的注意事项

• 洗涤的注意事项
• 洗涤的时间、方法视固定液的种类等而定；
• 水洗时，水流不宜太急。脱水的注意事项
• 脱水必须在有盖的玻璃器皿中进行，防止吸收空气中的水分；
• 在更换高一级的脱水剂时，最好不要移动材料，以免损坏；
• 在低浓度酒精中，每级停留时间不宜太长，防止材料解体；
• 在高浓度酒精中，每级停留的时间也不宜太长，防止材料变脆；
• 脱水必须彻底，否则不易透明。

第7页：五、思考题

五、思考题1.为什么切取病理材料时应加对照？2.为什么固定液要以新配为好？