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60 lab-3间接凝集反应检测血清类风湿因子.ppt

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本课件为《现代生物学实验》的实验三间接凝集反应检测血清类风湿因子部分,依次展开一教学要求、三材料与器材(略)等内容,并说明目的要求、原理、试剂器材、操作步骤与注意事项,便于课前预习和实验现场对照操作。

实验三间接凝集反应检测血清类风湿因子 一教学要求,学习凝集反应的类型及原理、掌握间接法检测血清类风湿因子的方法实验三间接凝集反应检测血清类风湿因子
实验三间接凝集反应检测血清类风湿因子 二实验原理(1)凝集反应原理细菌和细胞等,颗粒性抗原与相应抗体特异性结合后,在适量的电解质存在下,可以出现肉眼可见的凝集现象
实验三间接凝集反应检测血清类风湿因子 (2)间接凝集反应检测类风湿因子原理类风,湿因子(RF)是由于细菌、病毒等感染因子,引起体内产生的以变性IgG(一种抗体)为抗原的一种自身抗体
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第1页:一教学要求

  • 一教学要求
  • 学习凝集反应的类型及原理
  • 掌握间接法检测血清类风湿因子的方法实验三间接凝集反应检测血清类风湿因子

第2页:二实验原理(1)凝集反应原理细菌和细胞等

二实验原理(1)凝集反应原理细菌和细胞等颗粒性抗原与相应抗体特异性结合后,在适量的电解质存在下,可以出现肉眼可见的凝集现象,并将此种反应称为抗原抗体的凝集反应。根据检测凝聚反应的条件可将起分为玻片法,试管法和微量法。根据试验中抗原与抗体的检测方式分为2类:a.直接凝集反应,颗粒性抗原与抗体直接反应而凝集;b.间接凝集反应,将可溶性抗原事先吸附或偶联于与免疫无关的颗粒载体表面,制成致敏载体颗粒,再与相应抗体反应。此方法比较简单,但因敏感性较差,一般只用在颗粒抗原免疫后抗体效价的检测、血型配型检测和细菌检测等方面。

第3页:(2)间接凝集反应检测类风湿因子原理类风

(2)间接凝集反应检测类风湿因子原理类风湿因子(RF)是由于细菌、病毒等感染因子,引起体内产生的以变性IgG(一种抗体)为抗原的一种自身抗体。目前已知有四种类风湿因子,即IgM型、IgA型、IgG型、IgE型。其中IgM和IgA类风湿因子易于检测,而IgG类风湿因子难于测出。IgA类风湿因子及IgM类风湿因子对类风湿关节炎诊断有较好的参考价值。一般医院主要采用乳胶凝集法和酶联免疫吸附法测定类风湿因子。将IgG吸附于聚苯乙烯胶乳上,RF与其反应可产生凝集现象。

第4页:三材料与器材(略)

三材料与器材(略)

第5页:四操作步骤(1)在3块载玻片上分别加一滴

四操作步骤(1)在3块载玻片上分别加一滴RF阳性血清、RF阴性血清及待检血清。(2)加20ul IgG致敏的胶乳于各血清样品中,轻微晃动载玻片混匀。(3)1min后观察凝集反应发生情况

第6页:五注意事项(1)器材要洁净

五注意事项(1)器材要洁净、血清要新鲜、以确保结果可靠(2)注意阴性、阳性对照的设立(3)注意血清及致敏胶乳加样量的比例

第7页:六思考题(1)记录试验结果并进行分析

六思考题(1)记录试验结果并进行分析(2)探讨影响实验结果的因素

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