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44 Lab-2土壤细菌的分离与纯化.ppt

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本课件为《现代生物学实验》的实验二土壤细菌的分离与纯化部分,依次展开实验二土壤细菌的分离与纯化一教学要求通过、四操作步骤等内容,并说明目的要求、原理、试剂器材、操作步骤与注意事项,便于课前预习和实验现场对照操作。

实验二土壤细菌的分离与纯化一教学要求通过从土壤,中分离纯化细菌,初步掌握微生物的分离纯化方法和无菌操作技术
实验二土壤细菌的分离与纯化 单细胞挑取法简易单细胞挑取法microm,平板分离法streakplatemethodThemostcommonwayofseparating
实验二土壤细菌的分离与纯化 平板分离法streakplatemeth,odThemostcommonwayofseparatingbacterialcellsonthea
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第1页:实验二土壤细菌的分离与纯化一教学要求通过从土壤

实验二土壤细菌的分离与纯化一教学要求通过从土壤中分离纯化细菌,初步掌握微生物的分离纯化方法和无菌操作技术。二实验原理-常用的分离纯化方法microorganisms exist in nature as mixedpopulations. However, to study microorganismsin the laboratory we must have them in the formof a pure culture, that is, one in which allorganisms are descendants of the sameorganism.

第2页:单细胞挑取法简易单细胞挑取法microm

单细胞挑取法简易单细胞挑取法micromanipulator

第3页:平板分离法streakplatemeth

平板分离法streak plate methodThe most common way of separating bacterialcells on the agar surface to obtain isolatedcolonies is the streak plate method. It provides asimple and rapid method of diluting the sample bymechanical means. As the loop is streaked acrossthe agar surface, more and more bacteria arerubbed off until individual separated organismsare deposited on the agar. After incubation, thearea at the beginning of the streak pattern willshow confluent growth, while the area near theend of the pattern should show discrete colonies.

第4页:pourplatemethodAnoth

pour platemethodAnother method of separating bacteria is thepour plate method. With thepour platemethod, the bacteria are mixed with meltedagar until evenly distributed and separatedthroughout the liquid. The melted agar isthen poured into an empty plate and allowedto solidify. After incubation, discrete bacterialcolonies can then be found growing both onthe agar and in the agar.

第5页:spreadplatemethodThe

spreadplate methodThespin plate methodinvolves diluting thebacterial sample in tubes of sterile water,saline, or broth. Small samples of the dilutedbacteria are then pipetted onto the surface ofagar plates. A sterile, bent-glass rod is thenused to spread the bacteria evenly over theentire agar surface.

第6页:三材料与器材

  • 三材料与器材
  • 金黄色葡萄球菌(Staphylococcus)和普通变形菌(Proteus vulgaris)斜面菌种。
  • 已灭菌的牛肉膏、高氏1号、土豆蔗糖培养各1瓶,49.5 mL无菌水(带玻璃珠)1瓶、4.5 mL无菌水6管、80%乙酸、10%酚酸、95%乙醇。
  • 无菌培养皿12套、1 mL无菌移液管10支、土壤样品、天平等。

第7页:四操作步骤

  • 四操作步骤
  • 制备土壤稀释液

第8页:

第9页:倾注平板

倾注平板

第10页:倾注平板(续)

培养

第11页:接种和分离工具1.接种针2.接种环

  • 接种和分离工具1.接种针2.接种环3.接种钩4.5.玻璃涂棒6.接种圈7.接种锄8.小解剖刀
  • 挑菌落

第12页:

第13页:isolationplate

isolation plate

第14页:移接斜面常用的接种方法划线接种点接种穿刺

移接斜面常用的接种方法划线接种点接种穿刺接种涂布接种液体接种注射接种

第15页:斜面接种时的无菌操作(1)接种灭菌

斜面接种时的无菌操作(1)接种灭菌(2)开启棉塞(3)管口灭菌(4)挑起菌苔(5)接种(6)塞好棉塞

第16页:纯化(平板划线法)倒平板——划线——培养

纯化(平板划线法)倒平板——划线——培养——挑菌落——纯种(纯培养)

第17页:

第18页:平板划线分离的方法1.斜线法2.曲线法

平板划线分离的方法1.斜线法2.曲线法3.方格法4.放射法5.四格法

第19页:五注意事项

  • 五注意事项
  • 制备土壤稀释液时,要注意使土样均匀分散在稀释液中。
  • 注意无菌操作。六思考题
  • 试拟出从土壤中分离芽孢杆菌的主要实验步骤。
  • 如何检验平板上某个单菌落是不是纯培养?

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