页数:7页文件大小:195.5 KB来源: 现代生物学实验ppt课件
本课件为《现代生物学实验》的酶学模块的总结部分,系统梳理本实验的主要内容,并说明目的要求、原理、试剂器材、操作步骤与注意事项,便于课前预习和实验现场对照操作。要点清楚,步骤完整。
酶学模块的总结
有关酶学实验的拓展我们完成了酶的特异性(专一性),激活与抑制,温度和pH对酶活性的影响和酶反应动力学测定5个实验。这五个实验前四个是定性的,后一个是定量的。这部分与前一部分实验的交叉点是以淀粉为底物构成的一系统。
定性与定量之间的异同1、定性是研究的前期工作,是研究必不可少的环节。2、定性分析的比较也是以定量的可比性来完成的。3、定性实验有时会设计出极端的条件,如0℃或4℃了解温度对酶活力的影响。4、实验设计的组数比较少。5、结果比较直观可见。
定量分析的要求1、应先完成定性分析,以助设计。2、可通过文献资料掌握有关信息,以助设计。3、设计组数至少5组以上。4、操作要求更为严格。5、以酶促反应速度,通过适宜的方法,比较单位时间,单位酶量催化底物产生产物的增加(量)或底物的减少量来表示。
淀粉水解中颜色反应由蓝变蓝紫、变紫、变紫红、变红、最后变黄的过程,表示淀粉被水解的程度,由于各种颜色的溶液的最大吸光度波长不一样,可用分光光度计分析底物的减少,也可用已学的还原糖定量分析法分析葡萄糖的增加量。
拓展1、可通过以后要学习的实验,开展酶的分离,纯化,理化特性分析研究。2、纯化酶可进行结构、序列分析。3、可通过修饰等方法掌握酶的活性中心。4、可进行酶的细胞化学定位。5、可进行同功酶分析,了解不同物种、品种、品系的遗传性差异。
表现还欠缺的问题:1、部分同学预习不够深入,对方法原理体会不深,对操作步骤中为什么要这样做而不能那样做的问题理解不够,出现操作上的失误。如温度对酶活性影响中,为什么要设计置冰箱理解不好。2、操作上的失误还表现在一些常规的操作方法掌握不牢。如移液管的使用、分光光度计使用上的不规范等;如同组的重复样品,OD值有0.287、0.183这样大的误差等。3、实验报告中所反映出的实验数据理想化(被修改过),写作也不规范。4、仪器数量少,试剂浪费严重等。
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