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16 10.基因组和染色体A.ppt

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第十章基因组和染色体,列出核型、C值、原核基因组含有大量单、原核生物的细胞中除了主染色等7项概念与要点
第一节原核生物基因组的结构特点 E,列出第一节原核生物基因组的结构、E.coli2.4、类核、超螺旋以两种状态存等4项概念与要点
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第1页:第十章基因组和染色体

第十章基因组和染色体

  • 第十章基因组和染色体
  • 基因组( genome )是指一个细胞中遗传物质的总量。
  • 核型(Karyotype)
  • C值(C value)
  • 原核基因组含有大量单一顺序(unique-sequences),仅有少量的重复顺序。真核基因组含少量单一顺序和大量重复顺序。
  • 原核生物的细胞中除了主染色体以外,还含有各种质粒和转座因子。
  • 真核生物除了核染色体以外,还存在细胞器DNA。

第2页:第一节原核生物基因组的结构特点 E

第一节原核生物基因组的结构特点 E

  • 第一节原核生物基因组的结构特点
  • E.coli2.4×109Da,42000Kb(1300微米),闭合环状,约编码2000个基因。
  • 类核(nucleoid)。支架(scafford)100个DNA环组成,每个环长40Kb,13微米。每200bp就有一个负超螺旋(=0.05),即基因组中含5%的负超螺旋。
  • 超螺旋以两种状态存在:(1)自由状态的超螺旋,可在环内传递张力。(2)超螺旋受到束缚,不能传递张力。

第3页:

第4页:类核的结构

一.类核的结构

第5页:表10-1 E.coli含有的各种DNA

表10-1 E.coli含有的各种DNA

表10-1E.coli含有的各种DNA结合蛋白蛋白结构功能含量/每细胞相当于其核蛋白基因HUα和β亚基,每个9KD使DNA压缩、类核凝聚,刺激复制,和1HF有关4万个二聚体H2BhupA.BH两个相同亚基,各28KD促使双链的互补、复性3万个二聚体H2A?IHFα:10.5KD;β:9.5KD有助于att位点配对重组??himA.D.H1(H-NS)15KD亚基和DNA结合,与DNA拓扑结构有关1万?osZbglYpilGHLP117KD单体?2万?firAP3KD亚基??鱼精蛋白(DNA结合蛋白)?

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第6页:二重叠基因

二重叠基因

  • 二重叠基因(overlapping gene)
  • 莲人在绿杨津采一玉漱声歌新阙
  • 采莲人在绿杨津,在绿杨津一阙新;一阙新歌声漱玉,歌声漱玉采莲人。

第7页:1977年Sanger首先发现重叠基因

1977年Sanger首先发现重叠基因

  • 1977年Sanger首先发现重叠基因
  • 他对单链环状的噬菌体X174进行了测序。5386Nt 11 基因,3个转录单位,由3个启动子(pA,pB,pD)启动。
  • X174含有的5386Nt最多能编码1795个氨基酸,若每个氨基酸的平均分子量为110,则总的蛋白质分子量为197,000Da,但实际蛋白质总分子量却为262,000D。
  • 将全部DNA顺序和蛋白质的氨基酸顺序进行比较,发现了重叠基因

第8页:

第9页:重复基因Overlapping Gen

重复基因Overlapping Genes

第10页:质粒

三.质粒(plasmid) 1.抗性质粒(Resistance(R)plasmids):2.致育因子(Fertility(F)plasmids)3.Col质粒:有编码大肠杆菌素(colicins)基因。4.降解质粒(degradativeplasmids)。这种质粒编码一种特殊蛋白,可使宿主菌代谢特殊的分子,如甲苯或水杨酸。5.侵入性质粒(virulenceplasmids)。这些质。如Ti质粒,此是在根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)中发现的

第11页:

第12页:第二节真核基因组的复杂性 分子量约

第二节真核基因组的复杂性 分子量约

  • 第二节真核基因组的复杂性
  • 分子量约为3×1012道尔顿
  • 长度为2×106Kb,
  • 形态为线状,
  • 约编码10万个以下的基因。
  • 人类细胞在二倍体的核中DNA长约30亿个碱基对
  • 估计编码3万个基因,
  • 每条染色体含碱基8千万至3亿不等。
  • 现已有5千个基因被编目,1900个基因已进行了染色体定位,600个已被克隆分离出来。
  • 若将一个细胞中每条染色体的DNA首尾彼此相接,全长约200cm。

第13页:RenatoDulbecco于1986

RenatoDulbecco于1986

  • RenatoDulbecco于1986年首先提出了“人类基因组计划”,原计划约10-15年完成,耗资30亿美元,其宏伟的程度堪与Manhatto原子弹计划和Appolo登月计划相提并论。1990年开始实施
  • 1999破译出人类第22号染色体的遗传密码。
  • 2000完成了人类第21号染色体的测序。
  • 预计从原定的2003年6月提前到2001年6月完成。
  • 2000年6月26日美,英,日,德,法,中六国共同宣布人类基因组工作草图绘制成功。

第14页:2000年 3月塞莱拉公司宣布完成了果

2000年 3月塞莱拉公司宣布完成了果

  • 2000年
  • 3月塞莱拉公司宣布完成了果蝇的基因组测序。
  • 12月14日英美等国科学家宣布绘出拟南芥基因组的完整图谱。这是人类首次全部破译一种植物的基因序列。
  • 2001年:1、2月,HGP和美国塞莱拉(Sequencing)公司将各自测定的人类基因组工作框架图分别发表在Nature和Science上,这表明人类基因组计划(HGP)进入了一个展新的阶段。

第15页:2000

2000

  • 2000,4,5:以杨焕明为首的中国科学家在Science发表了水稻全基因组框架序列图。
  • 基因总数:46022~55615,约为人类的2倍;
  • 其中10000个基因的功能已确定;
  • 水稻的“垃圾”序列多位于基因外,人类的“垃圾”序列多位于基因内;
  • 水稻的基因平均长度为4500bp,人类基因平均长度为72000bp,
  • 拟南芥约有25000个基因,80%在水稻中都存在,二者之间有关信号传导的基因差别最大

第16页:

第17页:组蛋白

一.组蛋白组蛋白类型碱性氨基酸氨基酸数分子量(Da)LysArgH129%1%21523,000H2A11%9%12913,960H2B16%6%12513,775H310%13%13515,340H411%14%10211,280表12-2 小牛胸腺DNA的组蛋白的特点

第18页:核小体

核小体

  • 二.核小体(nucliesome)
  • 1956年Wilkins和VittorioLuzzati对染色质进行了X衍射研究,发现染色质具有间隔为100埃的重复性结构。这意味着甚麽?
  • Clark和Felsenfeld于1971年首先用葡萄球菌核酸酶(Staphylococcalnuclease)来作用染色质,不敏感的区域比较均一。这暗示甚麽?
  • 接着Hewish和Burgoyun(1973年)用内源核酸酶消化细胞核,再从核中分离出DNA,结果发现一系列DNA片段,它们相当于长约200bp的一种基本单位的多聚体。表明甚麽?
  • M.Noll(1974年)用外源核酸酶处理染色质,然后进行电泳,测得前三个片段的长度分别为205,405,605bp长,表明甚麽?

第19页:Olins夫妇

Olins夫妇

  • Olins夫妇(1974)和PierreChambon等(1975)在电镜下观察到染色质的“绳珠”状结构,小球的直径为100埃,Olins并把这种小球称为
  • 小体。
  • X衍射图表明组蛋白的多聚体是紧密相联,并无可容纳像DNA分子那样大小的孔洞,表明甚麽?
  • 1974年Kornberg和Thomas先用小球菌核酸酶稍稍消化一下染色质,切断一部分200核苷酸对单位之间的DNA,使其中含有单体、二聚体、三聚体和四聚体等。然后经离心将它们分开。每一组再通过凝胶电泳证明其分子大小及纯度。然后分别用电镜来观察各组的材料;结果单体均为一个100埃的小体,二聚体则是两个相联的小体,同样三聚体和四聚体分别由三个小体和四个小体组成,表明甚麽?
  • 1984年Klug和Butler进行了修正核小体模型。

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第21页:

第22页:核小体的梯度离心和电泳

核小体的梯度离心和电泳

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