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10 第六章高效液相色谱法.ppt

页数：36页文件大小：2.46 MB来源：仪器分析及实验ppt课件

本课件围绕高效液相色谱展开，从高效液相色谱法讲到化学键合相色谱，并延伸至空间排斥，说明相关原理、仪器结构与定量方法要点，逐页图示与文字版对照编排。适合课堂讲授与课后复习时对照查阅。

第六章高效液相色谱法，说明高效液相色谱法中Chapter Six High的原理与要点

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第1页：第六章高效液相色谱法

Chapter SixHigh Performance Liquid Chromatography（HPLC）第六章高效液相色谱法精品课程仪器分析(含实验)

第2页：液相色谱流程图

液相色谱流程图PUMPDetectorWData station (Recorder)or Collection王秋泉博士厦门大学化学系，教育部现代分析科学重点实验室Tel: 2181796; Email: qqwang@jingxian.xmu.edu.cn2001-2004

第3页：往复式高压恒流泵

往复式高压恒流泵

第4页：注射泵

注射泵

第5页：梯度洗脱（淋洗）低压梯度

梯度洗脱（淋洗）低压梯度高压梯度PUMPPUMPPUMP浓度时间

第6页：液相色谱流程图

液相色谱流程图PUMPDetectorWData station (Recorder)or Collection正相色谱反相色谱Reverse-phase Chromatography

第7页：液固色谱

液固色谱Liquid-Solid Chromatography

第8页：液固吸附色谱

液固吸附色谱Liquid-Solid ChromatographymadadmnMXnMX++以样品中各组分在固定相上的吸附作用不同来进行分离“相似相溶”原理异构体的分离

第9页：液液分配色谱

液液分配色谱Liquid-Liquid ChromatographyaqorgiiKiStationary phaseMobile phase固定液易流失化学键合固定相

第10页：化学键合相色谱

化学键合相色谱Bonded Phase ChromatographySiOH+ROHSiOR+H2OSiOH+R3SiClSiOSiR3+HCl1 功能基团的引入方法

第11页：化学键合相色谱

SOCl2ClRMgClRSiOHSiClSOCl2RMgClSiR化学键合相色谱Bonded Phase Chromatography

第12页：R-C4, -C8, -C18-C6H5

R-C4, -C8, -C18-C6H5, -CN, -NH2-SO3H, -COOH, -NR4＋Cl----------

第13页：正相色谱3

2正相色谱3 反相色谱RP-HPLC4 反相离子对色谱RP-Ion-Pair HPLCN[M(HQS)n]2-n

第14页：反相离子对色谱

反相离子对色谱RP-Ion-Pair HPLCMinutes02468101214Volts-0.10.00.10.20.30.4Volts-0.10.00.10.20.30.4MgCdZnChromatogram of Mg, Cd and Zn separation

第15页：离子交换色谱

5离子交换色谱

第16页：化学键合相色谱概述

化学键合相色谱Bonded Phase Chromatography

第17页：化学键合相色谱要点

化学键合相色谱Bonded Phase Chromatography

第18页：空间排斥（阻）色谱

空间排斥（阻）色谱Size Exclusion Chromatography硅胶型、聚苯乙烯型、葡聚糖凝胶型……

第19页：空间排斥

空间排斥（阻）色谱Size Exclusion ChromatographyM.W.tR

第20页：空间排斥说明

空间排斥（阻）色谱Size Exclusion ChromatographyM.W.tR

第21页：空间排斥构成

空间排斥（阻）色谱Size Exclusion ChromatographyM.W.tR

第22页：空间排斥示例

空间排斥（阻）色谱Size Exclusion ChromatographyM.W.tR

第23页：空间排斥结构

空间排斥（阻）色谱Size Exclusion ChromatographyM.W.tR

第24页：Conditions

Conditions: Column, Vydac C18, 5-mm, 30 nm (1 mm ID×100 mm)Flow rate, 40 mL/minMobile phase, A: 0.05% Formic Acid in WaterB: 0.05% Formic Acid in AcetonitrileLinear gradient programmed from 20% B to 100% B over 25 min,hold at 100% B for 5 minSample: mixture of 9 protein standards; 5-mL loopDetection: SCIEX TAGA 6000E triple quadrupole mass spectrometryequipped with ionspray atmospheric pressure ion source in

第25页：m-HPLC-Mass Spectrom

m-HPLC-Mass Spectrometry of Peptides and Proteins

第26页：Substance P from Pea

Substance P from Peak 1

第27页：Bovine Insulin from

Bovine Insulin from Peak 5

第28页：胰增血糖素）

Bovine Glucagon (胰增血糖素）from Peak 6