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本课件先介绍弧菌属的共同特征与主要致病弧菌,继而重点讲解霍乱弧菌的形态、培养、抗原与抵抗力,分析霍乱肠毒素的致病机制与临床表现,并说明隔离治疗、切断传播途径与疫苗预防等防治措施。
螺形菌:第八章螺形菌
弧菌属:第一节弧菌属(Vibrio),菌体短小,弯曲成弧形,革兰阴性菌,广布于自然界,水表面最多,氧化酶试验阳性,有单鞭毛,主要有霍乱弧菌和副溶血弧菌
人类感染有关的主要弧菌弧菌:与人类感染有关的主要弧菌弧菌人类疾病霍乱弧菌O1和O139血清群霍乱,可造成大流行甚至世界性大流行非O1和非O139霍乱弧菌血清群霍乱样腹泻,一般腹泻,偶尔,肠道外感染副溶血性弧菌胃肠炎,肠道外感染其他:拟态弧菌、创伤弧菌、霍利斯弧菌、河弧菌不常见
霍乱弧菌:霍乱弧菌霍乱弧菌(V.cholera)是人类霍乱的病原体,霍乱是一种古老且流行广泛的烈性传染病之一。曾在世界上引起多次大流行,主要表现为剧烈的呕吐、腹泻、失水,死亡率甚高。属于国际检疫的烈性传染病。
霍乱弧菌包括两个生物型:霍乱弧菌包括两个生物型:古典生物型(Classicalbiotype)和埃尔托生物型(EL-Torbio-type)。这两种型别除个别生物学性状稍有不同外,形态和免疫学性基本相同,在临床病理及流行病学特征上没有本质的差别。自1817年以来,全球共发生了七次世界性大流行,前六次病原是古典型霍乱弧菌,第七次病原是埃尔托型所致。
1992年10月在印度东南部:1992年10月在印度东南部又发现了一个引起霍乱流行的新血清型菌株(0139),它引起的霍乱在临床表现及传播方式上与古典型霍乱完全相同,但不能被01群霍乱弧菌诊断血清所凝集。该菌株在水中的存活时间较01群霍乱弧菌长,因而有可能成为引起世界性霍乱流行的新菌株。
生物学性状形态染色:一、生物学性状(一)形态染色,霍乱弧菌呈弧形或逗点形态,大小为1.4~2.6×0.5~0.8μm。革兰氏阴性菌,菌体一端有单根鞭毛和菌毛,无荚膜与芽胞。,取霍乱病人米泔水样粪便作活菌悬滴观察,可见细菌运动极为活泼,呈流星穿梭运动。
图注:图注:霍乱弧菌的鞭毛(↑)和它可溶解的鞘膜(↑↑)负染,×3 100图注:分裂中的霍乱弧菌冰冻蚀刻,×70 000
弧菌属的培养特性:(二)培养特性,霍乱弧菌为需氧或兼性厌氧菌;,营养要求不高,耐碱不耐酸,在pH8.8~9.0的碱性蛋白胨水或平板中生长良好。因其他细菌在这一pH不易生长,故碱性蛋白胨水可作为选择性增殖霍乱弧菌的培养基;,在碱性平板上菌落直径为2mm,圆形,光滑,透明。
抗原结构与分型耐热特异性高分:3.抗原结构与分型耐热特异性高分155个血清群O抗原H抗体无保护作用不耐热无特异性,弧菌属所共有H抗原O1血清群古典生物型EL Tor生物型6次霍乱大流行西奈半岛EL Tor地区发现第7次霍乱大流行O139群:1992年印度分离,流行于南亚和东南亚我国流行以El Tor、小川型霍乱弧菌为主。
1群霍乱弧菌的血清分型型别:O1群霍乱弧菌的血清分型型别别名O抗原成份原型稻叶型(Inaba)A、C异型小川型(Ogawa)A、B中间型彦岛型(Hikojima)A、B、C血清型:O1群霍乱弧菌的菌体抗原由A、B、C三个抗原成份组成
弧菌属的抵抗力:4.抵抗力,对热、干燥、酸、消毒剂都很敏感,100℃1~2min死亡,胃酸中存活4min,漂白粉(1:4)处理污染物1小时可达到消毒目的,霍乱弧菌对链霉素、氯霉素和四环素敏感,但ElTor生物型对一定浓度的多粘菌素B及庆大霉素有耐药性。
弧菌属的致病性:(二)致病性,1、致病物质---鞭毛、菌毛,粘液素酶,霍乱肠毒素(CT),–(1)鞭毛、菌毛及粘液素酶靠鞭毛运动,穿过粘液层,粘液素酶消化粘液粘附于肠壁上皮细胞刷状缘的微绒毛上
具有激活腺苷酸环化酶的酶活性:具有激活腺苷酸环化酶的酶活性A1肽链毒性单位1个A亚单位霍乱肠毒素结合B亚单位;参与转位A2肽链特异地识别肠上皮细胞膜上的神经节苷脂受体结合单位5个B亚单位(4~6)
致病机理霍乱弧菌胃对酸敏感:致病机理霍乱弧菌胃对酸敏感,很快被杀死肠胃酸降低或缺乏,菌体增多鞭毛、菌毛、粘液素酶绒毛上大量繁殖CT的B亚单位结合神经节苷脂受体形成膜通道A1肽链进入细胞
肠粘膜上皮细胞分泌亢进肠液:ATP→cAMP↑肠粘膜上皮细胞分泌亢进肠液大量分泌大量体液和电解质进入肠腔而发生剧烈吐泻大量脱水和失盐发生代谢性酸中毒,血循环衰竭,甚至休克或死亡激活腺苷酸环化酶系统
剧烈的喷射状呕吐:剧烈的喷射状呕吐,休克、电解质紊乱及酸中毒,腹泻物呈米泔水样,不治疗,死亡率达60%霍乱:一种残忍的瘟疫
传染源:传染源:患者及带菌者,人类是唯一易感者,摄入108-1010个细菌可造成感染,引起霍乱,传播途径:–经水传播–经食物传播–经生活接触传播–经苍蝇传播霍乱:一种残忍的瘟疫
弧菌属的免疫性:免疫性,体液免疫为主,可获得牢固的免疫力,很少再感染–血流中抗毒素、抗菌抗体、局部sIgA
微生物学检查法标本直接镜检:(三)微生物学检查法标本直接镜检分离培养涂片见G-性弧菌,鱼群状排列悬滴法观察细菌呈穿梭样运动碱性蛋白胨水增菌选择培养基为TCBS(阳性显黄色)病人粪便,肛拭(流行病学调查包括水样)
尽早隔离治疗–及时检出病人–:尽早隔离治疗–及时检出病人–治疗时适当补液和纠酸–应用抗生素缩短排菌期,减少霍乱毒素,切断传播途径–对粪便及呕吐物处理,防污染,保护易感人群–皮下接种死菌苗–口服减毒活疫苗保护率可达82--近100%(四)防治原则
副溶血性弧菌:二、副溶血性弧菌,形态染色–G-–一端有单鞭毛,培养–嗜盐,3.5-4.5%NaCl最适–营养要求不高
弧菌属的致病性:致病性,致病机制不清–耐热直接溶血毒素,绝大多数致病性副溶血性弧菌能产生,使人或家兔的红细胞溶解,该毒素也具有肠道毒性–耐热相关溶血素
致疾病:所致疾病:食物中毒–夏秋季多发,病程短,恢复快–腹痛、腹泻,呕吐及发热–水便、血便,免疫性:–病后免疫力不强–可重复感染血水样便
微生物检查法–分离培养:微生物检查法–分离培养:SS琼脂平板、嗜盐菌选择平板–生化反应、诊断血清–快速诊断:探针杂交、PCR,治疗–抗菌药–如庆大霉素或复方新诺明等–严重病例需输液和补充电解质
空肠弯曲菌:第二节空肠弯曲菌
弯曲菌属细菌是一类微需氧、不:弯曲菌属(Campylobacter)细菌是一类微需氧、不分解糖类、氧化酶阳性、菌体弯曲呈逗点状、S型或螺旋状、有动力的革兰氏阴性菌。,对人类致病的主要是空肠弯曲菌和胎儿弯曲菌胎儿亚种,前者是人类腹泻最常见的病原菌之一,后者在免疫功能低下时可引起败血症、脑膜炎等。、,幽门螺杆菌与慢性胃炎、十二指肠溃疡有关
生物学性状形态与染色空肠弯曲:一、生物学性状(一)形态与染色空肠弯曲菌(C.jejuni)菌体轻度弯曲似逗点状,长1.5~5μm,宽0.2~0.8μm。菌体一端或两端有鞭毛,运动活泼,在暗视野镜下观察似飞蝇。有荚膜,不形成芽胞。革兰氏阴性。图注:空肠弯曲菌的两端单鞭毛(↑)负染,×21 000
空肠弯曲菌的培养特性:(二)培养特性,为微需氧菌,在含2.5~5%氧和10%CO2的环境中生长最好。最适温度为37~42℃。在正常大气或无氧环境中均不能生长。,本菌营养要求高,需加入血液、血清才能生长。,在凝固血清和血琼脂培养基上培养36小时可见无色半透明毛玻璃样小菌落,单个菌落呈中心凸起,周边不规则,无溶血现象。
生化反应:(三)生化反应,空肠弯曲生化反应不活泼,不发酵糖类,不分解尿素,不液化明胶,靛基质阴性。,甲基红和VP试验阴性;,枸椽酸盐培养基中不生长。
空肠弯曲菌的抵抗力:(四)抵抗力,抵抗力不强,易被干燥、直射日光及弱消毒剂所杀灭,56℃5分钟可被杀死。,对红霉素、新霉素、庆大霉素、四环素、氯霉素、卡那霉素等抗生素敏感。但近年发现了不少耐药菌株。
抗原构造:(五)抗原构造,本菌抗原构造与肠道杆菌一样具有O、H和K抗原。,根据O抗原,可把空肠弯曲菌分成45个以上血清型。
致病性与免疫性:二、致病性与免疫性,空肠弯曲菌是多种动物如牛、羊、狗及禽类的正常寄居菌。,污染食物和饮水,可引起人类急性肠炎和食物中毒,其致病因素与肠毒素、内毒素、细胞毒素、侵袭力有关。,感染后能产生特异性血清抗体
微生物学诊断标本采集:三、微生物学诊断(一)标本采集:,取腹泻病人新鲜粪便或肛拭子立即送检。,如不能及时送检,应将标本接种于卡-布运送培养基。(二)检验程序:
幽门螺杆菌、生物学特性:二、幽门螺杆菌(Helicobacter pylori)(一)、生物学特性,在胃粘膜粘液层中常呈鱼群样排列,传代培养可变为杆状或球型。,微需氧菌,营养要求高,需血液或血清,菌落:细小、针尖、半透明,脲酶、氧化酶、过氧化氢酶丰富
致病性和免疫性致病物质:二、致病性和免疫性(一)致病物质1、鞭毛与※尿素酶2、黏附素3、脂多糖4、毒素(空泡毒素VacA、细胞毒素相关CagA)确切机制尚未完全阐明,与胃窦炎、十二指肠溃疡和胃溃疡关系密切,可能与胃癌的发生也有关(二)※所致疾病(人是唯一肯定传染源)功能性消化不良、慢性胃炎、消化性溃疡、胃癌、胃淋巴瘤、胃肠道外疾病、(三)免疫性(IgA和IgG→感染或疾病的标志)
微生物学检查法:三、微生物学检查法1、标本:胃镜采集组织活检标本2、分离培养与鉴定:37℃ 3天微需氧湿润3、快速诊断:组织学染色、快速尿素酶试验血清学、分子生物学尿素呼吸试验、粪便抗原测定四、防治原则:无有效预防尚无单一药物根除※抗酸分泌剂、铋剂、两种抗生素联合使用
霍乱弧菌生长繁殖的最适宜值范围是:1.霍乱弧菌生长繁殖的最适宜pH值范围是A. 4.0-6.0 B. 8.8-9.2C. 7.2-7.6 D. 6.0-7.0E. 2.0-5.02.能致人类食物中毒的病原菌是A.霍乱弧菌B.副溶血性弧菌C.溶血性链球菌D.志贺痢疾菌E.肺炎双球菌3.机体感染下列哪种病原菌后能获得牢固持久免疫力A.流感杆菌B.大肠杆菌C.痢疾杆菌D.肺炎链球菌E.霍乱弧菌4.霍乱弧菌的主要致病物质是A.肠毒素B.内毒素C.鞭毛D.菌毛E.荚膜
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