16 实验十四 食品中总汞的测定.doc

第1页：冷原子吸收法测汞原理与试剂

原理

汞蒸气对波长 253.7 nm 的共振线具有强烈吸收作用；样品经硝酸-硫酸或硝酸-硫酸-五氧化二钒消化使汞转为离子状态，在强酸性中以氯化亚锡还原成元素汞，以氮气或干燥清洁空气作为载体将汞吸出，进行冷原子吸收测定，与标准系列比较定量。

试剂：硝酸；硫酸；30% 氯化亚锡溶液（氯化亚锡 30 克加少量水与 2 ml 硫酸溶解后稀释至 100 ml，冰箱保存）；无水氯化钙（干燥用）；5N 混合酸液（硫酸 10 ml、硝酸 10 ml 慢慢倒入 50 ml 水中，冷后稀释至 100 ml）；五氧化二钒；5% 高锰酸钾溶液（配好煮沸 10 分钟，静置过夜过滤，棕色瓶保存）；20% 盐酸羟胺溶液。

标准溶液：精密称取 0.1354 克于干燥器干燥过的二氯化汞，加 5N 混合酸溶解后移入 100 ml 容量瓶稀释至刻度，此液每毫升相当于 1 mg 汞；吸取 1.0 ml 于 100 毫升容量瓶加 5N 混合酸稀释至刻度得每毫升 1 μg 汞，再吸取 1.0 ml 稀释至 100 ml 得每毫升 0.1 μg 汞，用时现配。

仪器：消化装置一套、测汞仪、汞蒸气发生器、抽气装置。

第2页：回流消化与五氧化二钒消化

回流消化法：粮食或水分少的食品称取 10 克，加玻璃珠数粒、45 ml 硝酸、10 ml 硫酸，转动锥形瓶防止局部炭化，装冷凝管后小心加热，待开始发泡即停止加热，发泡停止后加热回流 2 小时；如溶液变棕色再加 5 ml 硝酸继续回流 2 小时，放冷后从冷凝管上端小心加 20 ml 水，继续加热回流 10 分钟，放冷，冲洗冷凝管并入消化液，经玻璃棉过滤于 100 ml 容量瓶定容，并做试剂空白。

五氧化二钒消化法：适用于水产品、蔬菜、水果。取可食部分洗净晾干切碎混匀，取 2.50 克水产品或 10 克蔬菜水果置于 50-100 ml 锥形瓶，加 50 mg 五氧化二钒粉末与 8 ml 硝酸，振摇放置 4 小时，加 5 ml 硫酸混匀，移至 140℃ 砂浴加热，待瓶口基本无棕色气体逸出时用少量水冲洗瓶口再加热 5 分钟，放冷；加 5 ml 5% 高锰酸钾溶液放置 4 小时（或过夜），滴加 20% 盐酸羟胺溶液使紫色褪去，振摇放置数分钟后移入容量瓶稀释至刻度（蔬菜水果 25 ml，水产品 100 ml）。

第3页：冷原子吸收测定与计算

回流消化液的测定：吸取 10.0 ml 样品消化液置于汞蒸气发生器内，连接抽气装置，沿壁迅速加入 2 ml 30% 氯化亚锡溶液，立即通入流速 1.5 升/分的氮气或经活性炭处理的空气，使汞蒸气经过氯化钙干燥管进入测汞仪，读取最大读数，同时做试剂空白。

吸取 0.00、0.10、0.20、0.30、0.40、0.50 ml 汞标准使用液（相当于 0、0.01、0.02、0.03、0.04、0.05 μg 汞）置于试管中，各加 10 ml 5N 混合酸，按同法操作绘制标准曲线。

计算：X = (A1 - A2) × 1000 / [m × (V2 / V1) × 1000]，式中 X 为样品中汞的含量（mg/kg），A1 为测定用样品消化液中汞的含量（μg），A2 为试剂空白液中汞的含量（μg），m 为样品质量（g），V1 为样品消化液总体积（ml），V2 为测定用消化液体积（ml）。

五氧化二钒消化液的测定：吸取 10.0 ml 样品消化液按上法操作；标准系列吸取 0.0-0.5 ml 汞标准使用液（相当于 0-0.5 μg 汞）置于 6 个 50 ml 容量瓶，各加 1 ml 1:1 硫酸、1 ml 5% 高锰酸钾溶液与 20 ml 水，滴加盐酸羟胺使紫色褪去后定容，分别吸取 10.0 ml 依法操作绘制标准曲线，计算同上。

第4页：双硫腙法测汞原理与试剂

原理

样品经消化后，汞离子在酸性溶液中可与双硫腙生成橙色络合物，溶于三氯甲烷，与标准系列比较定量。

试剂：硝酸；硫酸；1N 硫酸（量取 5 ml 硫酸缓缓倒入 150 ml 水中，冷却后加水至 180 ml）；5% 硫酸；氨水；溴麝香草酚蓝指示液（0.1% 乙醇溶液）；20% 盐酸羟胺溶液（吹清洁空气可使所含微量汞挥发除去）；三氯甲烷（不应含氧化物）；双硫腙溶液与使用液（同铅的测定方法）。

汞标准溶液：精密称取 0.1354 克经干燥器干燥过的二氯化汞，加 1N 硫酸溶解后移入 100 ml 容量瓶稀释至刻度，此液每毫升相当于 1 mg 汞；吸取 1.0 ml 于 100 ml 容量瓶加 1N 硫酸稀释至刻度得每毫升 10 μg 汞；再吸取此液 5.0 ml 于 50 ml 容量瓶稀释至刻度得每毫升 1 μg 汞。仪器为消化装置与分光光度计。

第5页：双硫腙法样品消化

1. 粮食或水分少的食品：称取 20 克，加玻璃珠数粒及 80 ml 硝酸、15 ml 硫酸，装冷凝管后小火加热，发泡停止后加热回流 2 小时；溶液变棕色再加 5 ml 硝酸继续回流 2 小时，放冷后洗涤冷凝管并入消化液，加水至总体积 150 ml。
2. 植物油及动物油脂：称取 10 克，加玻璃珠数粒及 15 ml 硫酸，小心混匀至溶液变棕，再加 45 ml 硝酸，装冷凝管后同上操作。
3. 蔬菜、水果、薯类、豆制品：称取 50 克捣碎混匀的样品，加玻璃珠数粒及 45 ml 硝酸、15 ml 硫酸，同上操作。
4. 肉、蛋、水产品：称取 20 克捣碎混匀样品，加玻璃珠数粒及 45 ml 硝酸、15 ml 硫酸，同上操作。
5. 牛乳制品：称取 50 克牛乳、酸牛乳或相当的乳制品（6 克全脂乳粉、20 克甜炼乳、12.5 克淡炼乳），加玻璃珠数粒及 45 ml 硝酸，牛乳酸牛乳加 15 ml 硫酸、乳制品加 10 ml 硫酸，同上操作。

以上消化均需取与样品相同量的硝酸、硫酸按同一方法做试剂空白试验。

第6页：双硫腙法显色测定与计算

测定：取消化液全量加 20 ml 水，在电炉上煮沸 10 分钟除去二氧化氮等，放冷。于样品消化液及试剂空白液中各加 5% 高锰酸钾溶液至呈紫色，再加 20% 盐酸羟胺溶液使紫色褪去，加 2 滴麝香草酚蓝指示液，用氨水调节 pH 使橙红色变为黄色（pH 1-2），定量转移至 125 ml 分液漏斗中。

吸取 0.0、0.5、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 ml 汞标准使用液（相当于 0.0-6.0 μg 汞）分别置于 125 ml 分液漏斗，各加 10 ml 5% 硫酸再加水至 40 ml 混匀，各加 1 ml 20% 盐酸羟胺溶液，放置 20 分钟并时时振摇。

于样品消化液、试剂空白液及标准液中加 5.0 ml 双硫腙使用液，剧烈振摇 2 分钟，静置分层后经脱脂棉将三氯甲烷层滤入 1 cm 比色杯，以三氯甲烷调节零点，在波长 490 nm 处测吸光度；标准管吸光度减去零管吸光度绘制标准曲线。

计算：X = (A1 - A2) × 1000 / (m × 1000)，式中 X 为样品中汞的含量（mg/kg），A1 为测定用样品消化液中汞的含量（μg），A2 为试剂空白液中汞的含量（μg），m 为样品质量（g）。