15 实验十三 食品中铅的测定.doc

第1页：双硫腙比色法测铅的原理与试剂

原理

样品经消化后，在 pH 8.5-9.0 时铅离子与双硫腙生成红色络合物，溶于三氯甲烷；加入柠檬酸铵、氰化钾和盐酸羟胺等防止铁、铜、锌等离子干扰，与标准系列比较定量。

试剂：1:1 氨水；6N 盐酸；酚红指示液（0.1% 乙醇溶液）；20% 盐酸羟胺溶液（用 1:1 氨水调 pH 至 8.5-9.0，用双硫腙-三氯甲烷溶液提取至三氯甲烷层绿色不变，再以三氯甲烷洗二次，水层加 6N 盐酸呈酸性后加水至 100 毫升）；20% 柠檬酸铵溶液（同法调 pH 并除杂后稀释至 250 毫升）；10% 氰化钾溶液；三氯甲烷（不应含氧化物，可用 20% 硫酸钠溶液洗涤后蒸馏处理）；淀粉指示液；1% 硝酸；双硫腙溶液与双硫腙使用液。

标准溶液：精密称取 0.1598 克硝酸铅，加 10 ml 1% 硝酸溶解后移入 100 ml 容量瓶加水稀释至刻度，此溶液每毫升相当于 1 mg 铅；吸取 1.0 ml 于 100 毫升容量瓶稀释至刻度，得每毫升相当于 10 μg 铅的标准使用液。

第2页：铅试剂配制与仪器、样品消化

双硫腙纯化：称取 0.5 克研细的双硫腙溶于 50 ml 三氯甲烷，过滤于分液漏斗中，用 1:99 氨水提取三次每次 100 ml，提取液用棉花过滤后以 6N 盐酸调至酸性，沉淀出的双硫腙用三氯甲烷提取 2-3 次每次 20 ml，合并三氯甲烷层用等量水洗涤二次，在 50℃ 水浴上蒸去三氯甲烷，精制双硫腙置硫酸干燥器中干燥备用。

仪器：所用玻璃仪器均用 10-20% 硝酸浸泡 24 小时以上，自来水反复冲洗后用水冲洗干净；分光光度计。

硝酸-硫酸法消化：酱、酱油、醋、豆腐乳、酱腌菜等称取 10.0 克样品（或吸取 10.0 ml 液体样品）置于 250 ml 定氮瓶，加数粒玻璃珠与 10 ml 硝酸，放置片刻后小火加热，待作用缓和放冷，沿瓶壁加硝酸再加热，至液体开始变棕色时不断沿瓶壁滴加硝酸至有机质分解完全并产生白烟、溶液澄清无色或微带黄色；加 20 ml 水煮沸除去残余硝酸，如此处理两次，放冷后移入容量瓶定容（操作过程应注意防止爆炸）。含酒精或二氧化碳饮料先小火加热除去乙醇或二氧化碳；含糖量高的食品称取 1.0 克，先加水湿润后缓缓加入 10 ml 硫酸。湿法消化须同时作空白试验。

第3页：样品灰化与显色测定

灰化法消化：糕点及其他含水分少的食品称取 5.0 克置于坩埚中加热至炭化，移入高温炉 500℃ 灰化 3 小时，放冷后加 1 ml 硝酸湿润灰分，小火蒸干，在 500℃ 灼烧 1 小时，放冷取出坩埚，加 1 ml 硝酸加热使灰分溶解，移入 50 ml 容量瓶定容。含水分多的食品或液体样品称取 5.0 克或 5.0 ml 置于蒸发皿中，先在水浴上蒸干，再按上法自加热至炭化起操作。

测定：吸取 10.0 ml 消化后的定容溶液和同量试剂空白液分别置于 125 ml 分液漏斗中，各加水至 20 ml；吸取 0.00、0.10、0.20、0.30、0.40、0.50 ml 铅标准使用液分别置于 125 ml 分液漏斗中，各加 1% 硝酸溶液至 20 ml。于样品消化液、试剂空白液和铅标准液中各加 2 ml 20% 柠檬酸铵溶液、1 ml 20% 盐酸羟胺溶液和 2 滴酚红指示液，用 1:1 氨水调至红色，再各加 2 ml 10% 氰化钾溶液混匀，各加 5.0 ml 双硫腙使用液剧烈振摇 1 分钟，静置分层后三氯甲烷层经脱脂棉滤入 1 cm 比色杯，于波长 510 nm 处测吸光度，绘制标准曲线比较。

第4页：铅含量计算

计算：X = (A1 - A2) × 1000 / [m × (V2 / V1) × 1000]，式中 X 为样品中铅的含量（mg/kg 或 mg/L），A1 为测定用样品消化液中铅的含量（μg），A2 为试剂空白液中铅的含量（μg），m 为样品质量（体积，g 或 ml），V1 为样品消化液的总体积（ml），V2 为测定用样品消化液体积（ml）。