23 实验二十一 气相色谱法测定午餐肉中的有机氯农药.doc

第1页：气相色谱法原理与试剂标准液

原理

气相色谱法是一种较新的物理分离分析方法：样品组分气化后由载气携带通过填满固定相的色谱柱，因各组分在气-液（或气-固）两相中的分配（或吸附）系数不同而得到分离；柱后接检测器显示色谱峰，与有机氯农药标准溶液比较即可定性和定量。

试剂：丙酮（重蒸）；石油醚（60-90℃，经全玻璃系统蒸馏器重蒸至色谱图无异常）；无水硫酸钠（550℃ 灼烧 4 小时）；内标溶液以环氧七氯为内标（称环氧七氯 0.0100 克以上，用少许丙酮溶解后以石油醚定容至 100 毫升）。

C 液：分别取 8 种 B 液各 16、14、12、10、8 毫升置于 5 个 100 毫升容量瓶，各加 100 微升环氧七氯后用石油醚定容，配成几种不同浓度的应用标准液。

第2页：样品提取净化与色谱条件

仪器条件：103 型气相色谱仪，电子捕获检测器；色谱柱长 1.2 米、内径 3 毫米螺旋形不锈钢柱，固定液用 OV-17 3% 及 QF-1 5% 混合液，柱体 Chromosorb W 80-100 目；柱温 190℃，载气高纯氮气，检测温度 210℃，载气流 40 ml/分，汽化温度 210℃。

消化：称取均样 10 克于 200 毫升圆底瓶中，加入 35 毫升高氯酸-冰醋酸（1:1）混酸，于 90℃ 水浴上加热（加热时要不停振摇以免结成炭粒），直到样品完全溶解、溶液呈紫红色液体；冷却后加水 35 毫升（水:酸 = 1:1），如溶液发热仍需冷却。

抽提与净化：用沸程 60-90℃ 石油醚以 40、30、30 毫升萃取 3 次，合并萃取液通过无水硫酸钠柱子，抽提液全量为 100 毫升。将抽提液倒入 250 毫升分液漏斗，加 10 毫升浓硫酸（酸:石油醚 = 1:10），轻轻振摇静置分层（放置过夜），放掉下层酸液并重复 1-2 次；加 2% 硫酸钠 40、30、30 毫升洗至中性，加无水硫酸钠 5 克，定容至 100 毫升并加入内标环氧七氯 10 ml，进入气相色谱仪测定。

第3页：内标法计算农药残留量

测定：将配制的各种浓度标准 C 液进样，得到各浓度的标准色谱图，出峰顺序为 α-666、β-666、γ-666、δ-666、环氧七氯、PP'-DDE、OP'-DDT、PP'-DDD、PP'-DDT，并量取峰高值。取净化液适量（一般在 0.2-10 μl 之间，使其响应值在检测器线性范围内）注入气相色谱仪，选取与样品峰高相近的标准农药峰高代入下式计算农药残留含量（ppm）。

内标法计算：残留量（ppm）= (H / H') × (C / W) × (HO / HO') × (WO / CO')

H / H'

样品中该组分的峰高与标准液中该组分峰高之比。

HO / HO'

标样中内标的峰高与试样中内标的峰高之比。

C / W

注入色谱仪的标准液中该组分的浓度（μg/ml）与样品的重量之比。

WO / CO'

样品中所加入的内标重量（μg）与标准液中所含内标浓度（μg/ml）之比。