21 实验十九 蘑菇罐头中漂白剂的测定.doc

第1页：盐酸副玫瑰苯胺比色法原理与试剂

原理

二氧化硫被四氯汞钠吸收液吸收后生成稳定的络合物，再与甲醛和盐酸副玫瑰苯胺作用并经分子重排生成紫红色的络合物，颜色深浅与二氧化硫浓度成正比，可比色测定。

试剂及仪器：四氯汞钠吸收液（氯化汞 27.2 克、氯化钠 11.7 克溶于水中稀释至 1000 毫升，放置过夜过滤后使用）；显色剂（溶解盐酸副玫瑰苯胺 100 毫克于 200 毫升水中，加 40 毫升浓盐酸，定容至 500 毫升，置棕色瓶中）；2% 甲醛溶液（吸取 37-40% 甲醛 5 毫升稀释至 100 毫升）；1% 淀粉指示剂；冰醋酸；蛋白质沉淀剂（饱和硼砂溶液约 25 克硼砂溶于 500 毫升水，硫酸锌溶液 150 克硫酸锌溶于 500 毫升水）；0.1N 碘溶液；0.1N 硫代硫酸钠标准溶液；二氧化硫标准溶液；分光光度计。

第2页：二氧化硫标准液标定与标准曲线

二氧化硫标准溶液标定：称取 0.5 克亚硫酸氢钠溶于 200 毫升四氯汞钠吸收液中，放置过夜，上清液用定量滤纸过滤备用。取 10 毫升该溶液于 250 毫升碘价瓶中，加水 100 毫升、0.1N 碘溶液 20 毫升、冰醋酸 5 毫升，摇匀后用 0.1N 硫代硫酸钠溶液滴定至淡黄色，加 1% 淀粉指示剂 5-6 滴继续滴定至无色；空白试验于碘价瓶中加水 300 毫升按同法操作。

计算：SO2（毫克/毫升）= (V1 - V2) × N × 32.03 / 10，V1 为空白消耗硫代硫酸钠量（ml），V2 为标准消耗量（ml），N 为硫代硫酸钠当量浓度，32.03 为 0.1N 硫代硫酸钠溶液 1 毫升相当于二氧化硫的量（毫克）。据计算结果用吸收液稀释成 1 毫升相当于 2 μg 二氧化硫，此应用液于 4℃ 冰箱保存可供一周内使用。

样品处理与标准曲线：称取经捣碎蘑菇样品 20 克，加饱和硼砂溶液 5 毫升、硫酸锌 2 毫升，搅拌均匀移入 100 毫升容量瓶加水至刻度，过滤（滤液必须澄清，否则重复过滤）。吸取每毫升相当于 2 μg 的二氧化硫标准溶液 0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0 毫升于 25 毫升比色管中，各加 2% 甲醛溶液 1 毫升、显色剂 1 毫升，另依次加入 10、9、8、7、6、5 毫升吸收液，混匀静置 15 分钟，于分光光度计 580 nm 波长下测定。

第3页：样品分析与滴定法原理

样品分析：吸取滤液 5 毫升，加吸收剂 5 毫升、2% 甲醛溶液 1 毫升、显色剂 1 毫升，混匀静置 15 分钟，于分光光度计 580 nm 波长下测定光密度，据光密度从标准曲线查得相应二氧化硫含量。

计算：SO2（毫克/公斤）= C / W × 1000，C 为相当于标准的量（毫克），W 为测定时所取样品溶液相当于样品的量（克）。

注意事项：最适反应温度为 20-25℃，温度低灵敏度低，标准管与样品管需在相同温度下显色；15-16℃ 时放置时间需延长为 25 分钟，颜色稳定 20 分钟；盐酸副玫瑰苯胺中盐酸用量对显色有影响，用量多显色浅、用量少显色深；甲醛浓度在 0.15-0.25% 时颜色稳定，故选 0.2% 甲醛溶液；颜色较深的样品可用 10% 活性炭脱色；测定粉丝、粉条中的二氧化硫时样品要浸泡 30 分钟；样品加入四氯汞钠吸收液后定容，其中二氧化硫含量在 24 小时之内很稳定。

滴定法原理：样品中的二氧化硫包括游离的和结合的，加入氢氧化钾破坏其结合状态并使之固定：SO2 + 2KOH → K2SO3 + H2O；加入硫酸又使二氧化硫游离：K2SO3 + H2SO4 → K2SO4 + H2O + SO2；再以标准碘液滴定：SO2 + 2H2O + I2 → H2SO4 + 2HI。

第4页：滴定法测定二氧化硫

试剂及仪器：1N 氢氧化钾溶液（溶解 57 克氢氧化钠于蒸馏水中稀释至 1000 毫升）；1:3 硫酸溶液；0.01N 碘标准溶液；0.1% 淀粉溶液；250 毫升容量瓶；250 毫升碘价瓶或具塞锥形瓶。

操作：在小烧杯内称取试样 20 克（准确至 0.01 克），用蒸馏水将试样洗入 250 毫升容量瓶，加蒸馏水至总容量的二分之一，加塞振荡后再加蒸馏水至刻度摇匀。待瓶内液体澄清后，用 50 ml 移液管吸取澄清液 50 毫升注入 250 毫升碘价瓶，加 1N 氢氧化钾溶液 25 毫升，用力振摇后放置 10 分钟；然后一边振荡一边加入 1:3 硫酸溶液 10 毫升和淀粉液 1 毫升，以碘标准溶液滴定至呈现蓝色并半分钟不褪色为止，同时不加试样按上述进行空白试验。

计算：SO2 = (V1 - V2) × N × 0.032 × 5 / W × 100，V1 为滴定时所耗碘标准液的量（毫升），V2 为滴定空白试验所耗碘标准液的量（毫升），N 为碘标准溶液的规定浓度，W 为样品的重量（克），0.032 为二氧化硫的毫克当量。

源文件将终点描述为「呈现兰色并半分钟不褪色」，与淀粉指示剂的碘-淀粉蓝色复合物一致，此处按标准表述保留。