42 第五节应用与进展.ppt

第1页：高效毛细管电泳应用与进展

第十一章 高效毛细管电泳分析法 第五节 高效毛细管电泳应用与进展

• 离子分析
• 药物分析
• 手性化合物分析
• 氨基酸分析
• 核酸分析及DNA测序
• 新进展及热点问题

第2页：离子分析

离子分析

• 阳离子分析迁移方向和电渗流方向一致
• 4.5min内分离了24种金属离子
• 阳极进样，阴极检测
• 具有很高的灵敏度

第3页：阴离子分析

阴离子分析

• 阴离子电泳方向和电渗流方向相反、速度接近，分析时间长、效率低
• 质量小、电荷密度大的离子如：SO4-2、Cl-、F-等，电泳速率大于电渗流，阳极端流出，在阴极端无法检测
• 加入电渗流改性剂，十六烷基三甲基溴化胺等，使电泳方向和电渗流方向一致，可在3.1min内分离36种阴离子
• 阴极进样，阳极检测
• 离子价态及存在形态分析

第4页：药物分析

药物分析

• 检测体液或细胞中某些代谢产物的分析
• 尿液中的氨基酸含量作为临床诊断糖尿病的辅助手段
• 采用毛细管区带电泳方式，在11min内分离17种药物

第5页：采用

采用

• MEKC模式，鉴定违禁药物
• 效果优于HPLG法

第6页：手性化合物分析

手性化合物分析

• 合成获得单一手性化合物相当困难
• 528种手性合成药物，61中以单一对映体形式销售，其他为外消旋体
• 检测分析也相当困难
• 研究热点
• R-反应停是安眠药，S-式致胎儿畸形
• HPCE分离分析手性化合物的方法：加入手性选择剂
• 形成配合物的稳定常数有差异，结合HPCE的高效率
• 常用手性选择剂：环糊精及其衍生物
• 手性冠醚
• 手性表面活性剂（氨基酸衍生物、胆酸钠、牛磺脱氧胆酸及其钠盐、低聚糖等天然手性表面活性剂）

第7页：氨基酸与蛋白质分析

氨基酸与蛋白质分析

• 采用MEKC模式，在25分钟内分离了23种丹酰化氨基酸
• HPCE可取代传统的氨基酸分析仪
• 问题：吸附和检测

第8页：蛋白质分析

蛋白质分析。

第9页：核酸分析及DNA排序

核酸分析及DNA排序

• 重要分析手段
• 图，酶解的双螺旋DNA限制性片段的分离

第10页：新进展

新进展

• 1.微型化整体化学分析系统（TAS）及TAS微型化在硅片上光刻出矩形槽作为毛细管，理论塔板数105/m
• 2.联用仪器CE-MS
• 3.阵列毛细管凝胶电泳应用于人类基因DNA测序
• 5～10万个基因，30亿个碱基对，目前最有效的DNA序列分析仪，10小时/次
• 可同时电泳24个样品
• 速度1200碱基对/小时，提高速度！100支毛细管阵列电泳
• 速度280碱基对/小时/支

第11页：高效毛细管电泳分析法内容选择

高效毛细管电泳分析法内容选择

• 概述
• 高效毛细管电泳的理论基础
• 高效毛细管电泳仪器
• 高效毛细管电泳的分离模式
• 应用与进展