第1页:呼吸强度测定原理与气流法
本页交代目的原理、材料试剂与仪器,并给出气流法的装置连接与气密性检查。
- 目的及原理
- 呼吸作用是果蔬采收后的重要生理活动,是影响贮运效果的重要因素;测定呼吸强度可衡量呼吸作用强弱,了解果蔬采后生理状态,为低温和气调贮运及呼吸热计算提供必要数据。通常用定量碱液吸收果蔬在一定时间内呼吸释放的CO2,再用酸滴定剩余的碱,即可计算出呼吸释放的CO2量,单位为每公斤每小时释放CO2毫克数。
- 反应式
- 2NaOH+CO2→Na2CO3+H2O;Na2CO3+BaCl2→BaCO3↓+2NaCl;2NaOH+H2C2O4→Na2C2O4+2H2O。
- 测定方式
- 分为气流法和静置法两种。气流法设备较复杂但结果准确,果蔬处在气流畅通环境中,接近自然状态,可在恒定条件下长时间多次连续测定;静置法简便但准确性较差。
- 材料试剂与仪器
- 苹果、梨、柑桔、番茄、黄瓜、青菜等;钠石灰、20%氢氧化钠、0.4mol/L氢氧化钠、0.1mol/L草酸、饱和氯化钡溶液、酚酞指示剂、正丁醇、凡士林;真空干燥器、大气采样器、吸收管、滴定管架、铁夹、25ml滴定管、15ml三角瓶、500ml烧杯、培养皿、小漏斗、10ml移液管、洗耳球、100ml容量瓶、万用试纸、台称。
- 按图连接好大气采样器(暂不串接吸收管),检查不使有漏气;开动大气采样器中的空气泵,如果装有20%NaOH溶液的净化瓶中有连续不断的气泡产生,说明整个系统气密性良好,否则应检查各接口是否漏气。
第2页:气流法静置法操作与计算
本页给出气流法与静置法的操作步骤及呼吸强度计算公式。
- 用台称称取果蔬材料1公斤放入呼吸室,先将呼吸室与安全瓶连接,拨动开关将空气流量调在0.4升/分,将定时钟旋钮按反时针方向转到30分钟处,先使呼吸室抽空平衡半小时,然后连接吸收管开始正式测定。
- 空白滴定:用移液管吸取0.4mol/L的NaOH 10ml放入吸收管中,加一滴正丁醇,稍加摇动后将碱液毫无损失地移到三角瓶中,用煮沸过的蒸馏水冲洗五次直至显中性;加少量饱和BaCl2溶液和酚酞指示剂二滴,然后用0.1mol/L H2C2O4(草酸)滴定至粉红色消失即为终点,记下滴定量,重复一次取平均值即为空白滴定量(V1);两次滴定相差超过0.1ml须重新滴定。
- 样品测定:呼吸室抽空半小时后立即接上吸收管,把定时针重新转到30分钟处,调整流量保持0.4升/分;待样品测定半小时后取下吸收管,将碱液移入三角瓶中,加饱和BaCl2 5ml和酚酞指示剂二滴,用草酸滴定,记下滴定量(V2)。
- 静置法:用移液管吸取0.4mol/L的NaOH 20ml放入培养皿中,将培养皿放进呼吸室,放置隔板,装入1公斤果蔬,封盖,测定1小时后取出培养皿把碱液移入烧杯中(冲洗4~5次),加饱和BaCl2 5ml、酚酞2滴,用0.1mol/L草酸滴定,用同样方法做空白滴定,计算同气流法。
- 呼吸强度
- (CO2 mg/kg·h)= (V1−V2)×M×44/(W×h)
- M
- H2C2O4摩尔浓度(mol/L)
- W
- 样品重量(kg)
- h
- 测定时间(小时)
- 44
- CO2的毫摩尔质量
4. 记录与计算:列出计算式并计算结果。
第3页:呼吸作用与成熟衰老思考
本页给出本实验的思考题,要求结合前面气流法与静置法测得的呼吸强度数据作答。
5. 思考题:呼吸在果实成熟衰老中的作用是什么?